做了兩次ELISA，結(jié)果算出來(lái)都是負(fù)值，請(qǐng)問(wèn)這是什么原因呢？哪位大神可以幫忙分析一下?

帶不了圖文字描述下吧是一條豎著的連續(xù)的條帶不是文獻(xiàn)里的那種單獨(dú)的一條很深顏色的做了兩三個(gè)星期了都是這樣偶爾可以跑出來(lái)一條能看的至今不知道是什么原因

化合物分類，[Lasteditedby歡樂(lè)Q馬on2021-6-24at12:20]

最近實(shí)驗(yàn)需要用畢赤酵母表達(dá)一個(gè)酶，需要KM71H菌株，實(shí)驗(yàn)室只有一些基本的原核表達(dá)載體，有需要的話可以交換，萬(wàn)分感激。

誰(shuí)有miRNA RTprimer安裝包嗎

融合大標(biāo)簽一般都是在N端，先讓標(biāo)簽蛋白表達(dá)來(lái)促進(jìn)目的蛋白可溶，那HIS和一些小標(biāo)簽蛋白是放在目的蛋白的N端還是C端，依據(jù)是啥？融合在C端如何有“降解帶”，只有可能是目的蛋白降解產(chǎn)生，不可能是轉(zhuǎn)錄中止，蛋白會(huì)比在N端純一點(diǎn)嗎？問(wèn)了同事同事說(shuō)，翻譯一般從N端開(kāi)始，...

求助各位大神，本人現(xiàn)在用SephadexG-100純化糖蛋白，剛開(kāi)始的時(shí)候，柱子平衡好之后第一次過(guò)柱子峰形正常，第二次跑的峰形就出現(xiàn)雜峰峰形，于是每次灌柱后只跑一次�，F(xiàn)在灌好柱子后柱子下出口放低出水，一旦抬高放到收集器上就不怎么流，達(dá)不到接收測(cè)量的量，不知道問(wèn)...

請(qǐng)教各位前輩，我目前要純化一種蛋白，無(wú)標(biāo)簽，約60KD，PI5.1實(shí)驗(yàn)步驟如下：樣品處理：1.組織溶于等體積標(biāo)準(zhǔn)鹽溶液（含100mMKcl）樣品洗滌超聲離心棄上清取沉淀，重復(fù)3次2.沉淀復(fù)懸于5倍體積提取液（含500mmNacl）超聲離心棄上清取沉淀，重復(fù)2次...

這種圖能加嗎，好像沒(méi)有見(jiàn)過(guò)。應(yīng)該怎么弄？

TBST稀釋一抗忘記加土溫20到TBST里了，然后做了一次跑出來(lái)?xiàng)l帶了，結(jié)果不好，現(xiàn)在想重新做一次，能不能在用TBS稀釋的一抗里再加對(duì)應(yīng)體積的土溫了…

從網(wǎng)上看到豐輝生物的質(zhì)粒特別便宜，不知道各位誰(shuí)用過(guò)豐輝生物的質(zhì)粒，效果咋樣，

本人現(xiàn)在需要在一條30來(lái)個(gè)氨基酸的多肽的上接一個(gè)半乳糖，半乳糖上的一個(gè)氫用N3取代了，多肽上有一個(gè)端炔基。硫酸銅-抗壞血酸鈉體系，pH7.4左右的PBbuffer（含6M鹽酸胍），還加了銅配體THPTA，然后室溫反應(yīng)，氮?dú)獗Ｗo(hù)。反應(yīng)兩天后，反應(yīng)效率還是不高，都...

本人在測(cè)酶活時(shí)，重復(fù)了三次實(shí)驗(yàn)，做出了雙倒數(shù)圖，但是截距小于零，也就是說(shuō)Km是負(fù)的，大家遇到這種情況是怎么解決的？求助大神

如題，哪位大神有解決辦法

各路大神求問(wèn)下用于蛋白質(zhì)純化的Ni-IDA親和層析柱里面的填料怎么更換呀我有填料和已經(jīng)用過(guò)很久的柱子想更換填料但是不知道怎么操作謝謝大神們了�。�

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求助，大家有沒(méi)有做過(guò)非模式物種的DNA甲基化，問(wèn)了好幾家公司，都說(shuō)做不了，有的說(shuō)不能保證一定分析的出來(lái)�。�！想問(wèn)問(wèn)大家是去哪里做的，數(shù)據(jù)結(jié)構(gòu)怎么樣?

轉(zhuǎn)染是指將外源基因?qū)�入�?xì)胞內(nèi)的一種生物學(xué)技術(shù)。轉(zhuǎn)染可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。物理介導(dǎo)方法有電穿孔法、顯微注射和基因槍法,化學(xué)介導(dǎo)方法很多,如磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽(yáng)離子物質(zhì)介導(dǎo)技術(shù),生物介導(dǎo)方法,有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染,和現(xiàn)...

本人做了Ribo-seq，找了下游靶標(biāo)�，F(xiàn)在需要用實(shí)驗(yàn)證明其翻譯效率確實(shí)上調(diào)，目前還沒(méi)找到好的實(shí)驗(yàn)方法，想問(wèn)問(wèn)大家，除了熒光素酶報(bào)告基因，還有沒(méi)有其他可行的實(shí)驗(yàn)方法？？

查了資料，很少有相關(guān)的文獻(xiàn)，有知道的小伙伴告知一下哦~萬(wàn)分感謝！

各位老師同行大家好，真心發(fā)帖子，希望能得到幫助。我最近一段時(shí)間做貝類染色體，方法還是大家普遍使用的方法，以PHA(8μg/g體質(zhì)量)進(jìn)行肌肉注射,作用22～24h后注射秋水仙素(4μg/g體質(zhì)量),作用4～6h;取鰓組織剪碎,用0.075mol/LKCl低滲處...

請(qǐng)教一下，用大腸桿菌表達(dá)目的蛋白，超聲破碎后，使用鎳柱親和層析時(shí)，填料是Ni-IMAC，結(jié)合緩沖液是20mmol/L的Tris-HCl，500mmol/LNaCl，pH7.5。SDS-PAGE蛋白膠圖上，總是有三四十kDa的雜蛋白，應(yīng)該怎樣提高純化效果呢？

takaraTBfastqpcr用的abi7500，這樣的擴(kuò)增曲線正常嗎？還有我用的推薦程序退火延伸15s，不能運(yùn)行，只能改到了30s。用的是sybr通道，推薦是fam。也加了rox參比液。

【求助】請(qǐng)問(wèn)大家有沒(méi)有SCC-12/SCC-13人皮膚鱗癌細(xì)胞株？市面上買不到，審稿人建議用這個(gè)細(xì)胞系！萬(wàn)分感謝大家提供幫助，謝謝！