 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1764 | 回復(fù): 5 | |||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者蠔油生菜將贈(zèng)送您 5 個(gè)金幣 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
蠔油生菜新蟲 (小有名氣)
|
[求助]
蛋白表達(dá)BL21(DE3)轉(zhuǎn)接后搖不起來，sds-page無天然蛋白條帶 已有1人參與
|
||
| 在LB培養(yǎng)基中加入kana抗體和挑單克隆小搖的菌，過夜搖菌培養(yǎng)，第二天早上8.30按1：50的濃度接菌，此時(shí)過夜搖的菌od600大約1，要搖到下午3點(diǎn)od600才勉強(qiáng)到0.6左右，加iptg終濃度0.5mM，37℃200rpm誘導(dǎo)4h后菌液變的比未誘導(dǎo)對(duì)比組澄清很多，菌液中像沙石狀沉淀，然后直接煮沸跑sds-page什么條帶都沒有，一片空白的，我這個(gè)目的蛋白是一種蛋白酶，文獻(xiàn)中有表達(dá)過，也是用的bl21（de3），應(yīng)該不是有毒蛋白的問題吧 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有81人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
tangtuoxian
至尊木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 11 (小學(xué)生)
- 金幣: 10393.8
- 散金: 1514
- 紅花: 36
- 帖子: 2875
- 在線: 614.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1401655
- 注冊(cè): 2011-09-14
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
蠔油生菜: 金幣+5, ★★★很有幫助 2022-06-09 11:14:26
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
蠔油生菜: 金幣+5, ★★★很有幫助 2022-06-09 11:14:26
|
從新挑一個(gè)單克隆菌落，過夜搖起來（10ml）。第二天提取質(zhì)粒（用1-5ml，剩下的菌液保存起來），酶切之后，確定存在目的條帶。 如果克隆是對(duì)的，用保存起來的菌液過夜搖起來，重復(fù)之前的蛋白表達(dá)步驟。 如果再次出現(xiàn)相同情況，建議用提取的質(zhì)粒重新進(jìn)行轉(zhuǎn)化（仍然用BL21(DE3), 也可以嘗試其他表達(dá)菌株）。重復(fù)上述步驟。。。 |
6樓2022-06-09 10:56:07
2樓2022-06-08 20:53:32
ymj002
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 2730.4
- 帖子: 204
- 在線: 14.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 53819
- 注冊(cè): 2004-09-19
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
3樓2022-06-08 20:55:02
蠔油生菜
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 56.1
- 帖子: 57
- 在線: 81.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 27627102
- 注冊(cè): 2021-10-27
- 專業(yè): 生物化學(xué)
4樓2022-06-08 21:15:23
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085602化工求調(diào)劑 +6 | 董boxing 2026-03-10 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 收調(diào)劑 +5 | 調(diào)劑的考研學(xué)生 2026-03-10 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿天大化工（085600）調(diào)劑總分338 +5 | 蔡大美女 2026-03-09 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工 一志愿山大 321分 求調(diào)劑 +6 | 每天散步 2026-03-09 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 考研一志愿長安大學(xué)材料與化工309分請(qǐng)求調(diào)劑 +6 | dtdxzxx 2026-03-06 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，數(shù)一英一274分 +4 | 小菲會(huì)努力 2026-03-08 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿211 材料與化工 280求調(diào)劑 +3 | Sanity蔣 2026-03-08 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑，總分309分，一志愿華南師范 +3 | 花與葉@ 2026-03-08 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研求調(diào)劑，工科，總分304 +4 | 矮子不想長高了 2026-03-08 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 招調(diào)劑 +20 | 帆船哥 2026-03-04 | 23/1150 |
|
|
|
[考研] 一志愿211 化學(xué)305分求調(diào)劑 +3 | 0703楊悅305分 2026-03-05 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 誠求調(diào)劑，323分 有專利/科研/實(shí)習(xí)經(jīng)歷 +6 | 橙子cyx 2026-03-06 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 呼呼？~+123456 2026-03-05 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工354調(diào)劑 +4 | Lucy-xiao 2026-03-06 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | danyyyy 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 化工282求調(diào)劑一志愿211 +5 | NA0912 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0856材料專碩274能調(diào)劑去哪里？ +3 | 22735 2026-03-04 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 316求調(diào)劑 +3 | 林小星發(fā)大財(cái) 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑，總分320分，一志愿中南民族大學(xué) +3 | 19286712440 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +6 | 等春來， 2026-03-04 | 6/300 |
|