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蛋白表達BL21(DE3)轉接后搖不起來,sds-page無天然蛋白條帶 已有1人參與
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| 在LB培養(yǎng)基中加入kana抗體和挑單克隆小搖的菌,過夜搖菌培養(yǎng),第二天早上8.30按1:50的濃度接菌,此時過夜搖的菌od600大約1,要搖到下午3點od600才勉強到0.6左右,加iptg終濃度0.5mM,37℃200rpm誘導4h后菌液變的比未誘導對比組澄清很多,菌液中像沙石狀沉淀,然后直接煮沸跑sds-page什么條帶都沒有,一片空白的,我這個目的蛋白是一種蛋白酶,文獻中有表達過,也是用的bl21(de3),應該不是有毒蛋白的問題吧 |
木蟲 (小有名氣)
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