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蠔油生菜新蟲 (小有名氣)
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蛋白表達(dá)BL21(DE3)轉(zhuǎn)接后搖不起來(lái)，sds-page無(wú)天然蛋白條帶 已有1人參與
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| 在LB培養(yǎng)基中加入kana抗體和挑單克隆小搖的菌，過(guò)夜搖菌培養(yǎng)，第二天早上8.30按1：50的濃度接菌，此時(shí)過(guò)夜搖的菌od600大約1，要搖到下午3點(diǎn)od600才勉強(qiáng)到0.6左右，加iptg終濃度0.5mM，37℃200rpm誘導(dǎo)4h后菌液變的比未誘導(dǎo)對(duì)比組澄清很多，菌液中像沙石狀沉淀，然后直接煮沸跑sds-page什么條帶都沒有，一片空白的，我這個(gè)目的蛋白是一種蛋白酶，文獻(xiàn)中有表達(dá)過(guò)，也是用的bl21（de3），應(yīng)該不是有毒蛋白的問題吧 |
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蠔油生菜
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4樓2022-06-08 21:15:23
2樓2022-06-08 20:53:32
ymj002
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3樓2022-06-08 20:55:02
蠔油生菜
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但是這個(gè)蛋白的表達(dá)我參考了文獻(xiàn)做的，完全相同的蛋白，文獻(xiàn)中沒有看出是毒性蛋白，而且也是采用的相同的宿主菌dl21（de3）表達(dá)出來(lái)了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2022-06-08 21:17:38
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