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innocent.新蟲 (初入文壇)
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[交流]
無(wú)縫克隆遇到的奇奇怪怪 已有1人參與
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| 最近構(gòu)建載體，想速度快一點(diǎn)就沒(méi)用T4，直接用無(wú)縫克隆但一直失�。ㄓ玫闹Z唯贊試劑盒），酶切后無(wú)縫連接轉(zhuǎn)DH5a挑單菌落PCR，用目的片段引物P就有條帶且條帶長(zhǎng)度正確，但用載體引物就一直p不出來(lái)，換了載體引物也不行，又提質(zhì)粒酶切后發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)度與空載體長(zhǎng)度一致，是不是說(shuō)明沒(méi)連上，那為什么拿目的片段引物能p出來(lái)呢？實(shí)在疑惑，已經(jīng)重復(fù)做好幾次了都是這樣，三個(gè)基因都是這個(gè)問(wèn)題，大家有出現(xiàn)過(guò)這樣的情況嗎？ |
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金蟲 (小有名氣)
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2樓2024-10-19 13:47:32
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