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無縫克隆遇到的奇奇怪怪 已有1人參與
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| 最近構(gòu)建載體，想速度快一點就沒用T4，直接用無縫克隆但一直失�。ㄓ玫闹Z唯贊試劑盒），酶切后無縫連接轉(zhuǎn)DH5a挑單菌落PCR，用目的片段引物P就有條帶且條帶長度正確，但用載體引物就一直p不出來，換了載體引物也不行，又提質(zhì)粒酶切后發(fā)現(xiàn)長度與空載體長度一致，是不是說明沒連上，那為什么拿目的片段引物能p出來呢？實在疑惑，已經(jīng)重復做好幾次了都是這樣，三個基因都是這個問題，大家有出現(xiàn)過這樣的情況嗎？ |
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2樓2024-10-19 13:47:32
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