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請問如何科學計算酶突變體前后酶活的變化值 已有1人參與
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大家好,向大家請教一個問題: 鄙人最近在做酶的定向改造,需要對氨基酸序列中某些氨基酸殘基進行定點突變,以提高其催化活性,酶是通過胞外異源表達得到的。 但是考慮到通過發(fā)酵產(chǎn)酶,發(fā)酵液中的蛋白質(zhì)含量受到發(fā)酵時間、接種量以及菌種狀態(tài)等因素的影響,無法保證野生型菌株和突變體菌株發(fā)酵液中單位體積所含重組蛋白質(zhì)量的一致性,所以無法直接通過測定發(fā)酵液中的酶活,來比較突變體菌株所產(chǎn)酶活的變化,也就是不知道怎么保持突變前后測定條件的一致性。 所以想向大家請教一下,應該怎么科學地比較突變體酶活相對野生型菌株的變化值,這個問題最近困擾我很久了,求好心的大佬賜教。 @wizardfan @biostar2009 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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