 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1304 | 回復: 6 | |||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者想要搞科研將贈送您 5 個金幣 | |||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[求助]
求助！無縫克隆兩個問題 已有2人參與
|
|||
|
1求助為什么無縫克隆一直都連不上��？ 引物設計的沒有問題 濃度配比也試了很多 板長都不長，不是長了菌檢沒有條帶 2大搖完的菌液可以用小提試劑盒嘛？ 還是必須用小搖的菌 @youlinglyw @biostar2009 發(fā)自小木蟲Android客戶端 [ Last edited by 想要搞科研 on 2023-9-13 at 12:29 ] |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有242人回復
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
kuaile5420
專家顧問 (著名寫手)
- 應助: 72 (初中生)
- 貴賓: 0.232
- 金幣: 10312.4
- 散金: 124
- 紅花: 15
- 帖子: 1068
- 在線: 221.8小時
- 蟲號: 1836826
- 注冊: 2012-05-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 基因表達調(diào)控與表觀遺傳學
- 管轄: 生物醫(yī)藥區(qū)
【答案】應助回帖
|
問題1：相信整個實驗流程應該沒有問題，但大概率是實驗細節(jié)沒有注意到，導致反復多次仍然無法成功。具體原因可能是： 1）目的片段回收后有乙醇殘留：在加水洗脫前充分晾干； 2）受感受態(tài)狀態(tài)影響：-80℃取出感受態(tài)應立即放在冰上融化，不要穿梭實驗室； 3）同源重組后產(chǎn)物與感受態(tài)混合過于劇烈：在冰上輕輕吹打混勻； 4）熱擊后立即進行下游實驗：應在冰上放置2~3分鐘； 5) 菌液活化采用加了抗生素的LB培養(yǎng)基：熱擊將質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至感受態(tài)，還沒有進行抗性基因表達，加了抗生素后直接就把細菌殺死了，更換為無抗性的LB培養(yǎng)基即可； 6）LB固體平板中抗生素濃度過高：適當降低對應抗生素濃度。 問題2：大搖后的菌液是可以用小提試劑盒抽提，但是小提試劑盒柱子承載不了那么多的質(zhì)粒，過飽和會導致很多質(zhì)粒就浪費掉了。換言之，如果采用小提試劑盒抽提大搖菌液的話，需要將菌液進行分量提取。 |
7樓2023-09-28 08:42:00
hlp0809
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 459.9
- 帖子: 138
- 在線: 3.8小時
- 蟲號: 25594646
- 注冊: 2021-03-03
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物信息學
2樓2023-09-13 23:19:14
snoopyzxx
木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 4
- 應助: 49 (小學生)
- 金幣: 3232.6
- 散金: 1266
- 紅花: 43
- 帖子: 2256
- 在線: 276.6小時
- 蟲號: 548497
- 注冊: 2008-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 全球變化生態(tài)學
3樓2023-09-15 08:34:41
4樓2023-09-18 09:18:37
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 接受26屆調(diào)劑生 +15 | 豬豬豬毛 2026-03-06 | 15/750 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 一志愿南京大學資源與環(huán)境專業(yè)283分求調(diào)劑 +8 | 追云?? 2026-03-04 | 8/400 |
|
|
[考研] 290分材料工程085601求調(diào)劑 數(shù)二英一 +9 | llx0610 2026-03-02 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 280分 +13 | yyqqhh 2026-03-03 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 復試調(diào)劑 +5 | 呼呼？~+123456 2026-03-05 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +4 | 李LJR 2026-03-04 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0856材料與化工，270求調(diào)劑 +17 | YXCT 2026-03-01 | 20/1000 |
|
|
|
[考研] 材料與化工，291分，求調(diào)劑 +9 | 咕嚕咕嚕123123 2026-03-04 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 0703化學求調(diào)劑 +3 | 將未有期 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 325求調(diào)劑 +5 | 學家科 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[論文投稿]
EST拒稿重投
 5+3
|
15102603076 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 理學，工學，農(nóng)學調(diào)劑，少走彎路，這里歡迎您！ +8 | likeihood 2026-03-02 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 085700資環(huán)求調(diào)劑，初始279，六級已過，英語能力強 +3 | 085700資環(huán)調(diào)劑 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿中科大能動297求調(diào)劑，本科川大 +3 | 邵11 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +3 | MuoLuo1312 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 化工京區(qū)271求調(diào)劑 +7 | 11ing 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑。一志愿報考鄭州大學化學工藝學碩，總分295分 +8 | yl1 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 272求調(diào)劑 +9 | 材紫有化 2026-02-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 哈工大計算機劉劼團隊招生 +4 | hit_aiot 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +3 | 熊境喆 2026-03-01 | 3/150 |
|