 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1299 | 回復(fù): 6 | ||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者想要搞科研將贈(zèng)送您 5 個(gè)金幣 | ||
想要搞科研新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
求助！無縫克隆兩個(gè)問題 已有2人參與
|
|
|
1求助為什么無縫克隆一直都連不上啊？ 引物設(shè)計(jì)的沒有問題 濃度配比也試了很多 板長(zhǎng)都不長(zhǎng)，不是長(zhǎng)了菌檢沒有條帶 2大搖完的菌液可以用小提試劑盒嘛？ 還是必須用小搖的菌 @youlinglyw @biostar2009 發(fā)自小木蟲Android客戶端 [ Last edited by 想要搞科研 on 2023-9-13 at 12:29 ] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有193人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
hlp0809
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 459.9
- 帖子: 138
- 在線: 3.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 25594646
- 注冊(cè): 2021-03-03
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物信息學(xué)
2樓2023-09-13 23:19:14
snoopyzxx
木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 4
- 應(yīng)助: 49 (小學(xué)生)
- 金幣: 3232.6
- 散金: 1266
- 紅花: 43
- 帖子: 2256
- 在線: 276.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 548497
- 注冊(cè): 2008-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 全球變化生態(tài)學(xué)
3樓2023-09-15 08:34:41
想要搞科研
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 25.4
- 帖子: 21
- 在線: 7.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 28763489
- 注冊(cè): 2022-02-25
- 專業(yè): 農(nóng)學(xué)基礎(chǔ)
4樓2023-09-18 09:18:37
S小金人
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 28.5
- 帖子: 8
- 在線: 40分鐘
- 蟲號(hào): 27798923
- 注冊(cè): 2021-11-22
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
5樓2023-09-18 14:40:12
snoopyzxx
木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 4
- 應(yīng)助: 49 (小學(xué)生)
- 金幣: 3232.6
- 散金: 1266
- 紅花: 43
- 帖子: 2256
- 在線: 276.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 548497
- 注冊(cè): 2008-04-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 全球變化生態(tài)學(xué)
6樓2023-09-18 17:17:02
kuaile5420
專家顧問 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 72 (初中生)
- 貴賓: 0.232
- 金幣: 10312.4
- 散金: 124
- 紅花: 15
- 帖子: 1068
- 在線: 221.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 1836826
- 注冊(cè): 2012-05-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
- 管轄: 生物醫(yī)藥區(qū)
【答案】應(yīng)助回帖
|
問題1：相信整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程應(yīng)該沒有問題，但大概率是實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)沒有注意到，導(dǎo)致反復(fù)多次仍然無法成功。具體原因可能是： 1）目的片段回收后有乙醇?xì)埩簦涸诩铀疵撉俺浞至栏桑?br /> 2）受感受態(tài)狀態(tài)影響：-80℃取出感受態(tài)應(yīng)立即放在冰上融化，不要穿梭實(shí)驗(yàn)室； 3）同源重組后產(chǎn)物與感受態(tài)混合過于劇烈：在冰上輕輕吹打混勻； 4）熱擊后立即進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)：應(yīng)在冰上放置2~3分鐘； 5) 菌液活化采用加了抗生素的LB培養(yǎng)基：熱擊將質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至感受態(tài)，還沒有進(jìn)行抗性基因表達(dá)，加了抗生素后直接就把細(xì)菌殺死了，更換為無抗性的LB培養(yǎng)基即可； 6）LB固體平板中抗生素濃度過高：適當(dāng)降低對(duì)應(yīng)抗生素濃度。 問題2：大搖后的菌液是可以用小提試劑盒抽提，但是小提試劑盒柱子承載不了那么多的質(zhì)粒，過飽和會(huì)導(dǎo)致很多質(zhì)粒就浪費(fèi)掉了。換言之，如果采用小提試劑盒抽提大搖菌液的話，需要將菌液進(jìn)行分量提取。 |
7樓2023-09-28 08:42:00
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 想要搞科研 的主題更新
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 080500材料科學(xué)與工程 +10 | 202114020319 2026-03-03 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，學(xué)校研究所都可以，材料與化工267分 +3 | wmx1 2026-03-05 | 3/150 |
|
|
[考研] 中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)材料與化工281求調(diào)劑，有科研和獲獎(jiǎng)經(jīng)歷 +11 | wsxw 2026-03-02 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程 求調(diào)劑 +7 | xiiiia 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 376求調(diào)劑 +3 | 王浩然sam 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +8 | 一個(gè)學(xué)習(xí)者 2026-03-04 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 267化工調(diào)劑求助 +5 | 聰少OZ 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿314求調(diào)劑 +7 | 202111120625 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 325求調(diào)劑 +5 | 學(xué)家科 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085700資環(huán)求調(diào)劑，初始279，六級(jí)已過，英語能力強(qiáng) +3 | 085700資環(huán)調(diào)劑 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 276求調(diào)劑 +8 | 路lyh123 2026-02-28 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 266材料化工求調(diào)劑 +3 | 哇塞王帥 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +5 | 13853210211 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0856調(diào)劑 +10 | 劉夢(mèng)微 2026-02-28 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 11408，學(xué)碩276求調(diào)劑 +3 | 崔wj 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大材料學(xué)碩298分，求調(diào)劑 +6 | wsl111 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 264求調(diào)劑 +4 | 巴拉巴拉根556 2026-02-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +3 | Y墨明棋妙Y 2026-02-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 291分工科求調(diào)劑 +9 | science餓餓 2026-03-01 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 295復(fù)試調(diào)劑 +3 | 簡(jiǎn)木ChuFront 2026-03-01 | 3/150 |
|