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aaabndj新蟲 (初入文壇)
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[交流]
大腸桿菌轉(zhuǎn)化 有菌 一直無陽性? 已有3人參與
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大腸桿菌轉(zhuǎn)化 有菌 無陽性 之前構(gòu)過的一個載體,我做了三次,都沒構(gòu)出來 平末端 直接重組的 流程就是擴基因,切載體,重組 ,沒用T4連接酶,最后板子上長了菌,但是菌檢一個陽性都沒有 做了三次了都做不出來,師姐讓我下次用T4連接,到底是哪一步出錯了啊 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (小有名氣)
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第一,擴基因用的酶擴增出的片段是平末端嗎,有的酶擴增結(jié)束會在3‘加A;第二,平末端連接也應(yīng)該使用T4連接酶才能連上吧,沒有磷酸二酯鍵形成不了質(zhì)粒,線性片段轉(zhuǎn)進菌裡很快就被降解了 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
木蟲 (正式寫手)
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金蟲 (小有名氣)
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