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tchv8378新蟲 (小有名氣)
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[求助]
酶切拖帶和切不開的現(xiàn)象 已有2人參與
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求助，我在用PCR的擴增液做單酶切，之前做的好好的沒什么問題，最近發(fā)現(xiàn)按照之前完全相同的流程酶切切不開或者切開有拖帶的現(xiàn)象。我開封了新的引物，新的內(nèi)切酶，延長了酶切時間，減小了點樣時擴增液的點樣量，重新提了DNA，將buffer（10x）的含量提升到了酶切體系的1/10，酶切時間從2小時、4小時到過夜都有嘗試過但還是沒有達到之前的水平。 請問大佬還有其他什么原因嗎？萬分感謝！ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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2樓2022-09-18 18:34:04
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5樓2022-09-18 21:10:49
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6樓2022-09-19 17:14:29
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我也是按照之前的電壓和膠濃度跑的，電泳液也是新配的。下一步我想除了排除氣溶膠之外，試試用3%的膠，100v電壓多跑一會兒（之前用的2%的，電泳120v 45min-1h）。 鏈接: https://pan.baidu.com/s/1_QWukaB_V9Mav23MLQCecg 提取碼: 364r |
7樓2022-09-19 17:45:06
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9樓2022-09-20 22:34:35
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