 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1198 | 回復(fù): 3 | ||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者M(jìn)ilkttttea將贈送您 10 個(gè)金幣 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
Milkttttea新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
無縫克隆連不上
|
|
|
用的維諾贊的C112無縫克隆試劑盒，不太清楚問題出在哪了，載體酶切膠回收濃度28ng/ul，片段特意條帶柱回收33.8ng/ul，按說明書用的1:2比例（0.03:0.06pmol），37度pcr儀反應(yīng)30min，冰上冷卻就轉(zhuǎn)化了，用的takara的DH5a，冰浴30min，45s熱激，冰浴2min，無抗soc搖1h，5000rpm離心5min，留100ul重懸涂板。 最后沒有一個(gè)克隆長出來。 設(shè)計(jì)的引物F端的15bp同源臂GC含量高一點(diǎn)有67%，R端剛好40%，不知道是不是問題在這，或者說感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率的問題，把熱激時(shí)間提高到90s？或者說把重組時(shí)間提高到1h？ 再或者說重新設(shè)計(jì)F端同源臂，我看了22bp的同源臂才是低于60%GC @youlinglyw 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有83人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
fengxueren
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 640.3
- 紅花: 6
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 397
- 在線: 32.6小時(shí)
- 蟲號: 10208015
- 注冊: 2018-09-08
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物病理學(xué)
3樓2022-08-20 16:38:21
Milkttttea
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 71.9
- 帖子: 35
- 在線: 8.7小時(shí)
- 蟲號: 29651958
- 注冊: 2022-05-27
- 專業(yè): 微生物學(xué)
2樓2022-08-20 15:32:02
蘑菇張
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 19.9
- 散金: 62
- 帖子: 74
- 在線: 5.1小時(shí)
- 蟲號: 25271023
- 注冊: 2021-02-25
- 專業(yè): 食品科學(xué)
4樓2022-12-03 09:30:58
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 接受26屆調(diào)劑生 +18 | 豬豬豬毛 2026-03-06 | 18/900 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 0703求調(diào)劑 +6 | c297914 2026-03-06 | 7/350 |
|
|
[考研] 334求調(diào)劑 +7 | Trying] 2026-03-06 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿蘇大材料工程專碩293求調(diào)劑 +4 | 鋼鐵大炮 2026-03-04 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +5 | 一二LV 2026-03-07 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿西工大材料學(xué)，英一數(shù)二總分321分，求調(diào)劑。 +4 | zz05zz 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +10 | yang婷 2026-03-02 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 物理學(xué)求調(diào)劑 +3 | sx宋 2026-03-05 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +5 | 呼呼？~+123456 2026-03-05 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 泡了個(gè)椒 2026-03-04 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué) 學(xué)碩 理工科均可 不區(qū)分研究方向 總分279求調(diào)劑 +7 | 1一11 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +4 | xuyuan111 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 成績276，專業(yè)代碼0856求調(diào)劑 +10 | 小陳朵 2026-03-03 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑，總分320分，一志愿中南民族大學(xué) +3 | 19286712440 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿314求調(diào)劑 +7 | 202111120625 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085602化學(xué)工程350，調(diào)劑，有沒有211的 +5 | 利好利好. 2026-03-02 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 267求調(diào)劑 +6 | 釣魚佬as 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)0703求調(diào)劑 學(xué)碩 理/工科均可 總分279 +3 | 1一11 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0854復(fù)試調(diào)劑 276 +5 | wmm9 2026-03-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +3 | 恒順自然 2026-03-02 | 3/150 |
|