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mxc137新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
關(guān)于滾環(huán)擴(kuò)增的問(wèn)題求助
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我最近在做滾環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物與帶有熒光基團(tuán)和猝滅基團(tuán)的莖環(huán)序列雜交的實(shí)驗(yàn)，通過(guò)讓莖環(huán)打開(kāi)，來(lái)實(shí)現(xiàn)信號(hào)的放大。但是我試了很多辦法，幾乎檢測(cè)不到信號(hào)，甚至實(shí)驗(yàn)組比空白實(shí)驗(yàn)信號(hào)還要低。我檢查了序列配對(duì)，沒(méi)有任何問(wèn)題。而我通過(guò)讓莖環(huán)序列與它互補(bǔ)的單鏈結(jié)合，就會(huì)產(chǎn)生明顯的信號(hào)，證明莖環(huán)序列是沒(méi)有問(wèn)題的。 我覺(jué)得是莖環(huán)序列沒(méi)有與滾環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物結(jié)合上。 所以希望各位能給點(diǎn)建議或指導(dǎo)，是什么原因?qū)е碌倪@個(gè)問(wèn)題，或者說(shuō)大家有什么意見(jiàn)或者建議，感謝大家的幫助和指導(dǎo)。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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pennchem
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4樓2022-01-14 15:52:19
pennchem
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2樓2022-01-14 12:13:34
mxc137
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結(jié)合上的話，熒光團(tuán)會(huì)遠(yuǎn)離猝滅團(tuán)，產(chǎn)生熒光信號(hào)。擴(kuò)增成功的表現(xiàn)是可以通過(guò)凝膠電泳實(shí)驗(yàn)，觀察到有明亮條帶。目前是，有正確的條帶，但是加入莖環(huán)序列后經(jīng)過(guò)檢測(cè)沒(méi)有信號(hào)。 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
3樓2022-01-14 14:41:46
mxc137
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5樓2022-01-14 16:03:10
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