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反對派銀蟲 (正式寫手)
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[求助]
PCR熱蓋的問題溫度設定多少度 已有3人參與
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| 用PCR管在PCR儀里面37℃酶切，熱蓋溫度是設定37℃，還是其它溫度？ 理由是什么？ |
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atikou
銅蟲 (小有名氣)
- 應助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 74.9
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- 在線: 18.9小時
- 蟲號: 22783210
- 注冊: 2020-06-10
- 專業(yè): 基因表達調控與表觀遺傳學
【答案】應助回帖
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熱蓋的位置在PCR儀器的上部，蓋好PCR儀以后緊貼PCR管管蓋的即為熱蓋。現在的PCR儀一般均配備熱蓋，PCR儀的熱蓋溫度有默認設置。一般應該在100℃以上，但如果這個設置被改了，或者運行程序的時候根本沒有選擇使用熱蓋，就會造成樣品損失。熱蓋溫度一般設為105℃，使樣品管頂部的溫度達到105℃左右，蒸發(fā)的反應液就不會產生凝集在管蓋上而改變反應體積，這樣用戶就無需再向反應管內加石蠟油，直接減少后繼反應的麻煩。如果是旋轉加壓的熱蓋就要特別小心，因為壓力到達時沒有明顯的提示，用戶需要根據經驗將熱蓋旋到合適位置，不太容易掌握。如果過松，熱蓋沒有充分接觸反應管而影響結果；如果過緊，則會導致反應管變形，甚至可能造成熱蓋的機械故障。最新的ESP技術是指熱蓋加熱時不接觸樣品管，避免加熱樣品管導致非特異產物，等加熱到設定溫度后熱蓋下降，將樣品管壓入加熱模塊，下降時間和壓力都由電子控制。 熱蓋的位置在PCR儀器的上部，蓋好PCR儀以后緊貼PCR管管蓋的即為熱蓋。一般實驗過程中比反應溫度高5-10℃即可。 ----------來自深圳市易基因的回復 |
4樓2022-03-25 21:25:16
【答案】應助回帖
★
感謝參與，應助指數 +1
反對派: 金幣+1, ★有幫助 2021-12-21 17:15:34
感謝參與，應助指數 +1
反對派: 金幣+1, ★有幫助 2021-12-21 17:15:34
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熱蓋107攝氏度，pcr儀中熱蓋的作用是避免水蒸氣凝結在管頂部，至于酶切溫度37，加熱模塊會控制樣品溫度的 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2021-12-16 23:54:28
dehong1573
至尊木蟲 (正式寫手)
- 應助: 62 (初中生)
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- 注冊: 2007-11-05
- 性別: GG
- 專業(yè): 病原細菌與放線菌生物學
3樓2021-12-17 07:58:36
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本帖內容被屏蔽 |
5樓2024-12-10 16:59:49
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