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反對(duì)派銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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PCR熱蓋的問(wèn)題溫度設(shè)定多少度 已有3人參與
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| 用PCR管在PCR儀里面37℃酶切，熱蓋溫度是設(shè)定37℃，還是其它溫度？ 理由是什么？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
反對(duì)派: 金幣+1, ★有幫助 2021-12-21 17:15:34
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反對(duì)派: 金幣+1, ★有幫助 2021-12-21 17:15:34
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熱蓋107攝氏度，pcr儀中熱蓋的作用是避免水蒸氣凝結(jié)在管頂部，至于酶切溫度37，加熱模塊會(huì)控制樣品溫度的 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
2樓2021-12-16 23:54:28
dehong1573
至尊木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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3樓2021-12-17 07:58:36
atikou
銅蟲(chóng) (小有名氣)
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【答案】應(yīng)助回帖
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熱蓋的位置在PCR儀器的上部，蓋好PCR儀以后緊貼PCR管管蓋的即為熱蓋�，F(xiàn)在的PCR儀一般均配備熱蓋，PCR儀的熱蓋溫度有默認(rèn)設(shè)置。一般應(yīng)該在100℃以上，但如果這個(gè)設(shè)置被改了，或者運(yùn)行程序的時(shí)候根本沒(méi)有選擇使用熱蓋，就會(huì)造成樣品損失。熱蓋溫度一般設(shè)為105℃，使樣品管頂部的溫度達(dá)到105℃左右，蒸發(fā)的反應(yīng)液就不會(huì)產(chǎn)生凝集在管蓋上而改變反應(yīng)體積，這樣用戶(hù)就無(wú)需再向反應(yīng)管內(nèi)加石蠟油，直接減少后繼反應(yīng)的麻煩。如果是旋轉(zhuǎn)加壓的熱蓋就要特別小心，因?yàn)閴毫Φ竭_(dá)時(shí)沒(méi)有明顯的提示，用戶(hù)需要根據(jù)經(jīng)驗(yàn)將熱蓋旋到合適位置，不太容易掌握。如果過(guò)松，熱蓋沒(méi)有充分接觸反應(yīng)管而影響結(jié)果；如果過(guò)緊，則會(huì)導(dǎo)致反應(yīng)管變形，甚至可能造成熱蓋的機(jī)械故障。最新的ESP技術(shù)是指熱蓋加熱時(shí)不接觸樣品管，避免加熱樣品管導(dǎo)致非特異產(chǎn)物，等加熱到設(shè)定溫度后熱蓋下降，將樣品管壓入加熱模塊，下降時(shí)間和壓力都由電子控制。 熱蓋的位置在PCR儀器的上部，蓋好PCR儀以后緊貼PCR管管蓋的即為熱蓋。一般實(shí)驗(yàn)過(guò)程中比反應(yīng)溫度高5-10℃即可。 ----------來(lái)自深圳市易基因的回復(fù) |
4樓2022-03-25 21:25:16
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5樓2024-12-10 16:59:49
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