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反對(duì)派銀蟲 (正式寫手)
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PCR熱蓋的問題溫度設(shè)定多少度 已有3人參與
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| 用PCR管在PCR儀里面37℃酶切,熱蓋溫度是設(shè)定37℃,還是其它溫度? 理由是什么? |
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熱蓋107攝氏度,pcr儀中熱蓋的作用是避免水蒸氣凝結(jié)在管頂部,至于酶切溫度37,加熱模塊會(huì)控制樣品溫度的 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
至尊木蟲 (正式寫手)

銅蟲 (小有名氣)
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熱蓋的位置在PCR儀器的上部,蓋好PCR儀以后緊貼PCR管管蓋的即為熱蓋,F(xiàn)在的PCR儀一般均配備熱蓋,PCR儀的熱蓋溫度有默認(rèn)設(shè)置。一般應(yīng)該在100℃以上,但如果這個(gè)設(shè)置被改了,或者運(yùn)行程序的時(shí)候根本沒有選擇使用熱蓋,就會(huì)造成樣品損失。熱蓋溫度一般設(shè)為105℃,使樣品管頂部的溫度達(dá)到105℃左右,蒸發(fā)的反應(yīng)液就不會(huì)產(chǎn)生凝集在管蓋上而改變反應(yīng)體積,這樣用戶就無需再向反應(yīng)管內(nèi)加石蠟油,直接減少后繼反應(yīng)的麻煩。如果是旋轉(zhuǎn)加壓的熱蓋就要特別小心,因?yàn)閴毫Φ竭_(dá)時(shí)沒有明顯的提示,用戶需要根據(jù)經(jīng)驗(yàn)將熱蓋旋到合適位置,不太容易掌握。如果過松,熱蓋沒有充分接觸反應(yīng)管而影響結(jié)果;如果過緊,則會(huì)導(dǎo)致反應(yīng)管變形,甚至可能造成熱蓋的機(jī)械故障。最新的ESP技術(shù)是指熱蓋加熱時(shí)不接觸樣品管,避免加熱樣品管導(dǎo)致非特異產(chǎn)物,等加熱到設(shè)定溫度后熱蓋下降,將樣品管壓入加熱模塊,下降時(shí)間和壓力都由電子控制。 熱蓋的位置在PCR儀器的上部,蓋好PCR儀以后緊貼PCR管管蓋的即為熱蓋。一般實(shí)驗(yàn)過程中比反應(yīng)溫度高5-10℃即可。 ----------來自深圳市易基因的回復(fù) |
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