 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 6853 | 回復(fù): 9 | |||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者學員CSJmmu將贈送您 20 個金幣 | |||
學員CSJmmu銅蟲 (小有名氣)
|
[求助]
質(zhì)粒提取濃度低，很多方法都試過了，求助大佬們解決方法 已有3人參與
|
||
|
質(zhì)粒提取濃度低，多的時候100ng/ul，少的時候只有20多。很多網(wǎng)上提示的點都改正過了。 菌是新從庫存里劃的，搖菌時間16小時左右，后來又把質(zhì)粒轉(zhuǎn)化之后重新劃，再提取依然是沒有提高。根據(jù)官網(wǎng)的信息，質(zhì)粒是高拷貝。 抗生素濃度加倍過，也有在8小時左右的時候再加過一次（因為有人說氨芐會慢慢分解導(dǎo)致雜菌生長），也沒有效果。 提取用的是天根的質(zhì)粒小提試劑盒，菌液用了1.5毫升（主要是多了之后裂解效果不是很好，即使五分鐘了也比較渾濁） PW洗過之后有在室溫放置5-10分鐘以揮發(fā)酒精 EB buffer有提前65水浴過，加入洗脫液后室溫放置2分鐘，洗脫了兩次。 另外偶爾有提取稍微高一點的時候就去酶切了，切膠回收效率更低。。。點樣應(yīng)該有1微克，但是收回后也就只有幾納克了。 因為這倆操作上有相似之處，所以想問問大佬們是不是我有哪種共性的錯誤導(dǎo)致兩個實驗效率都很低。 謝謝大家～ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有157人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
kshdd
金蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 2819.8
- 散金: 763
- 紅花: 12
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 1795
- 在線: 432.2小時
- 蟲號: 3384976
- 注冊: 2014-08-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學
2樓2021-09-25 13:23:03
軒轅佑德
至尊木蟲 (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 10520.6
- 散金: 380
- 紅花: 15
- 帖子: 4483
- 在線: 456.2小時
- 蟲號: 4809358
- 注冊: 2016-07-01
- 性別: GG
- 專業(yè): 人類遺傳學
3樓2021-09-25 15:44:46
網(wǎng)海一粟
鐵桿木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 24813.6
- 帖子: 2922
- 在線: 121.9小時
- 蟲號: 249466
- 注冊: 2006-05-06
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學
|
你用的什么擴增菌株？保存在表達菌株里的質(zhì)�；蚰惆奄|(zhì)粒轉(zhuǎn)化到了表達菌株，那確實量少。如果這些信息不清楚，按你現(xiàn)在的做法，準備個1.5mLx5或更多的裂解上清，用同一根柱子吸附就行了。另外pw洗過后沒必要放，延長離心時間到4分鐘就行了，去酒精效果更好 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2021-09-26 04:20:21
網(wǎng)海一粟
鐵桿木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 24813.6
- 帖子: 2922
- 在線: 121.9小時
- 蟲號: 249466
- 注冊: 2006-05-06
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學
5樓2021-09-26 04:23:17
6樓2021-09-27 22:16:09
7樓2022-04-22 11:17:16
ScortRB
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 31.8
- 帖子: 7
- 在線: 2.1小時
- 蟲號: 11020158
- 注冊: 2018-10-23
- 性別: GG
- 專業(yè): 免疫生物學
8樓2022-04-24 16:56:50
tybo 
金蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1010.9
- 散金: 100
- 紅花: 3
- 帖子: 1390
- 在線: 330.8小時
- 蟲號: 1896213
- 注冊: 2012-07-16
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學
【答案】應(yīng)助回帖
| 樓主用的什么方法提取呀？可能的原因就是1、加樣量是不是太少？2、如果是磁珠法，洗脫液的量是不是太多了？3、裂解不充分；歡迎樓主和我們上海領(lǐng)駿生物的技術(shù)進行溝通交流；也可以用用上海領(lǐng)駿生物的質(zhì)粒DNA快速提取試劑(磁珠法)，我們實驗室做的效果非常好；www.lnjnbio.com |
9樓2023-11-15 08:54:36
AD_com
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 44 (小學生)
- 金幣: 927.2
- 散金: 9
- 帖子: 157
- 在線: 91.3小時
- 蟲號: 29310367
- 注冊: 2022-03-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 作物種質(zhì)資源與遺傳育種學
10樓2023-11-21 08:37:07
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 學員CSJmmu 的主題更新
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 313求調(diào)劑 +3 | 水流年lc 2026-02-28 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料085600 303求調(diào)劑 +7 | 1bygone 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 286 +6 | ksncj 2026-03-04 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 282求調(diào)劑 +5 | 2103240126 2026-03-02 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0703化學 一志愿東北大學 279分求調(diào)劑 +4 | 聶樂平 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料專碩290求調(diào)劑 +3 | 杰尼龜aaa 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +8 | yang婷 2026-03-02 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +4 | 是樂渝哇 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0805總分292，求調(diào)劑 +12 | 幻想之殤 2026-03-01 | 12/600 |
|
|
|
[考研]
材料270求調(diào)劑
 6+6
|
Eiiiio 2026-03-01 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿中科大能動297求調(diào)劑，本科川大 +3 | 邵11 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0856調(diào)劑 +10 | 劉夢微 2026-02-28 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 11408，學碩276求調(diào)劑 +3 | 崔wj 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +9 | 滿頭大汗的學生 2026-02-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料工程274求調(diào)劑 +5 | Lilithan 2026-03-01 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 261求調(diào)劑 +3 | 陸lh 2026-03-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 哈工大計算機劉劼團隊招生 +4 | hit_aiot 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 291分工科求調(diào)劑 +9 | science餓餓 2026-03-01 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 317一志愿華南理工電氣工程求調(diào)劑 +6 | Soliloquy_Q 2026-02-28 | 11/550 |
|