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zzzzz347新蟲 (初入文壇)
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[交流]
DNA單鏈退火形成雙鏈 已有6人參與
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我自己設(shè)計(jì)了兩條完全互補(bǔ)的DNA單鏈,用純水稀釋,95℃熱激5min,室溫退火,通過凝膠電泳驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)只能形成很少的雙鏈。但是用同樣的操作處理文獻(xiàn)中的兩條單鏈DNA,是能夠成功合成大量的雙鏈的。有沒有大佬知道這是什么問題? 自己在網(wǎng)上嘗試了幾種退火緩沖,也更改過熱激溫度,但效果不明顯,到現(xiàn)在還是只有極少數(shù)的雙鏈,大部分序列還是單鏈,問題到底出在哪里 |
至尊木蟲 (著名寫手)
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你可以問一下合成序列的公司,讓他們的銷售聯(lián)系一下技術(shù)服務(wù)。一般大一點(diǎn)公司都會做這些。 我沒做過這個(gè),但是感覺這個(gè)要精確控制降溫速度吧!降低退火降溫速度,試試梯度降溫? 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
鐵蟲 (初入文壇)
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