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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 核酸雜交 » DNA單鏈退火形成雙鏈
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[交流]
DNA單鏈退火形成雙鏈 已有6人參與
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我自己設計了兩條完全互補的DNA單鏈，用純水稀釋，95℃熱激5min，室溫退火，通過凝膠電泳驗證，發(fā)現(xiàn)只能形成很少的雙鏈。但是用同樣的操作處理文獻中的兩條單鏈DNA，是能夠成功合成大量的雙鏈的。有沒有大佬知道這是什么問題？ 自己在網(wǎng)上嘗試了幾種退火緩沖，也更改過熱激溫度，但效果不明顯，到現(xiàn)在還是只有極少數(shù)的雙鏈，大部分序列還是單鏈，問題到底出在哪里  |
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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你可以問一下合成序列的公司，讓他們的銷售聯(lián)系一下技術服務。一般大一點公司都會做這些。 我沒做過這個，但是感覺這個要精確控制降溫速度吧！降低退火降溫速度，試試梯度降溫？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2021-05-30 08:10:05
3樓2021-05-30 11:15:01
4樓2021-05-31 13:32:30
仰望守護
銀蟲 (正式寫手)
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5樓2021-07-17 00:46:38
6樓2021-09-16 09:01:57
7樓2021-12-24 20:17:17
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