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zzzzz347新蟲 (初入文壇)
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[交流]
DNA單鏈退火形成雙鏈 已有6人參與
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我自己設(shè)計(jì)了兩條完全互補(bǔ)的DNA單鏈，用純水稀釋，95℃熱激5min，室溫退火，通過凝膠電泳驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)只能形成很少的雙鏈。但是用同樣的操作處理文獻(xiàn)中的兩條單鏈DNA，是能夠成功合成大量的雙鏈的。有沒有大佬知道這是什么問題？ 自己在網(wǎng)上嘗試了幾種退火緩沖，也更改過熱激溫度，但效果不明顯，到現(xiàn)在還是只有極少數(shù)的雙鏈，大部分序列還是單鏈，問題到底出在哪里  |
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hanxiaominhu
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你可以問一下合成序列的公司，讓他們的銷售聯(lián)系一下技術(shù)服務(wù)。一般大一點(diǎn)公司都會(huì)做這些。 我沒做過這個(gè)，但是感覺這個(gè)要精確控制降溫速度吧！降低退火降溫速度，試試梯度降溫？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2021-05-30 08:10:05
3樓2021-05-30 11:15:01
grm楓
鐵蟲 (初入文壇)
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4樓2021-05-31 13:32:30
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5樓2021-07-17 00:46:38
6樓2021-09-16 09:01:57
zl52
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我也遇到了這個(gè)問題 之前的樣品都沒事兒 現(xiàn)在重復(fù)合成雙鏈 卻都是部分合成 也不知道哪里出了問題 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
7樓2021-12-24 20:17:17
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