 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 20 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2179 | 回復(fù): 19 | |||
| 【有獎交流】積極回復(fù)本帖子，參與交流，就有機會分得作者 開水中游泳 的 2 個金幣 ，回帖就立即獲得 1 個金幣，每人有 1 次機會 | |||
[交流]
化合物肝臟毒性體外細胞評價
|
|||
|
一、肝臟毒性簡介 肝臟是人類與動物最重要的器官之一，它擔(dān)任著代謝與解毒兩大最主要的功能，但它極容易遭受到多種因素的損傷（如：肝炎病毒、藥物毒性、食物發(fā)霉或酒精等）。由這些因素引發(fā)的急性肝損傷（Acute liver failure，ALF）會導(dǎo)致肝細胞大面積壞死或凋亡、肝細胞脂肪變性、炎癥反應(yīng)以及氧化應(yīng)激，甚至肝功能損害，它是一種嚴重的疾病并伴有較高的死亡率。因此，采取有效改善肝臟損傷的措施，可能對肝臟疾病的防治起到至關(guān)重要作用。 至今，藥物性肝損傷（drug-induced liver injury，DILI）仍然是全球一項嚴重的公共衛(wèi)生問題，而由對乙酰氨基酚（Acetaminophen，APAP）誘導(dǎo)的 ALF 占其主導(dǎo)地位。過量的 APAP 在肝臟經(jīng)過一系列的反應(yīng)，會產(chǎn)生大量活性氧（ROS）引起肝臟嚴重的氧化損傷，最終導(dǎo)致急性肝損傷。因此，抑制過度的炎癥反應(yīng)和劇烈的氧化應(yīng)激在防治這兩種肝損傷的致病過程中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。 藥物中毒不僅是歐洲國家是主要導(dǎo)致急性肝損傷的因素，在我國也是主要引起急性肝損傷的原因。據(jù)統(tǒng)計，在美國，藥物性肝損傷（drug-induced liver injury，DILI）患者在總急性肝衰竭患者中占有約 57 %的比例，在英國（占 51 %），而在蘇格蘭高達 75 %。在我國，據(jù)全國多中心急性藥物性肝損傷住院病歷調(diào)查分析結(jié)果顯示，急性藥物性肝損傷的發(fā)病率呈逐年增加趨勢。 二、肝臟毒性機理 在藥物中毒引起的急性肝損傷中，由對乙酰氨基酚（Acetaminophen，APAP）導(dǎo)致的急性肝損傷占其主導(dǎo)地位。在治療劑量下，APAP大部分被二磷酸尿核苷（UDP）葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶(UGT）和硫酸基轉(zhuǎn)移酶（SULT）等 II 期代謝酶代謝成無毒化合物，隨尿液排出。只有很小一部分以不變的方式排泄在尿液中。其余約 5-9 %APAP 由細胞色素 P450 酶（CYPs）代謝，主要由 CYP2E1 轉(zhuǎn)化為高反應(yīng)性的中間代謝物 N-乙酰苯亞胺基醌（NAPQI）。一般來說，NAPQI 通過與谷胱甘肽（GSH）結(jié)合而迅速解毒。然而，當(dāng) APAP 過量時會導(dǎo)致 II 期代謝酶飽和，產(chǎn)生過量的 NAPQI 會使谷胱甘肽（glutathione，GSH）消耗殆盡，從而剩下的 NAPQI 則會與細胞膜分子發(fā)生反應(yīng)，尤其與線粒體蛋白中巰基的共價結(jié)合，進而導(dǎo)致線粒體氧化應(yīng)激和功能障礙，最終引起肝細胞壞死。 急性肝損傷（ALF）的致病機制極為復(fù)雜，其中氧化應(yīng)激、線粒體功能失調(diào)、炎癥反應(yīng)以及自噬等與其都有著密切的關(guān)聯(lián)。 氧化應(yīng)激是指體內(nèi)的氧化與抗氧化系統(tǒng)的平衡失調(diào)，活性氧（reactive oxygen species，ROS）過度積累從而導(dǎo)致組織細胞損傷。在 APAP 誘導(dǎo)的急性肝損傷過程中，過多的 APAP 被細胞色素 P450 酶代謝成 NAPQI，它的過度積累進而干擾線粒體電子傳遞鏈復(fù)合物 I/II（ETC），導(dǎo)致電子從 ETC 向氧泄漏，形成超氧自由基。超氧化物自由基一旦形成，就會在線粒體中被錳超氧化物歧化酶（manganese superoxide dismutase，MnSOD）分解成H2O2和O2，或與內(nèi)源性NO反應(yīng)形成過氧亞硝基（ONOO−）。然而，H2O2能夠被肝細胞中的 GSH、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GPx）、過氧化物還原酶（peroxiredoxin，Prx）等多種抗氧化酶清除。同時，線粒體中形成的 ONOO−也可與 GSH 反應(yīng)，從而被清除。由于這些過量的自由基會導(dǎo)致 GSH 耗竭，引起 ONOO−的積累，進而使硝基酪氨酸蛋白加合物的形成，最終引發(fā)線粒體 DNA 的損傷和肝毒性。目前，N-乙酰半胱氨酸（N-acetyl cysteine，NAC）是臨床上治療 APAP 誘導(dǎo)的 ALF 在用的解毒劑，它主要通過補充 GSH 來增強 NAPQI 的解毒作用。但是，該藥物還存在一些缺陷，比如副作用和治療窗口狹窄等問題。一般來說，NAC 的不良反應(yīng)不會危及生命，但也會引起惡心、嘔吐和初始輸注時的過敏性反應(yīng)。同時，它的解毒效果，主要是針對 APAP 中毒前 8 小時，之后治療效果明顯開始下降。因此，探究一些有效治療 APAP 肝損傷的藥物和潛在靶標，特別是對于那些在晚期出現(xiàn)的患者，仍然相當(dāng)需要。近年來，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多分子參與 APAP 誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激的調(diào)節(jié)，尤其是 Nrf2，這些分子可能是 APAP 誘導(dǎo)的 ALF 潛在的治療靶點。 在許多方面，炎癥是一種機體改善組織損傷和愈合的生理反應(yīng)。然而，炎癥過程的嚴重失衡會導(dǎo)致許多疾病的發(fā)生及各種組織損傷。過度的炎癥反應(yīng)也是引發(fā) ALF 發(fā)生的主要原因之一。首先，多種炎性因子可以直接或間接的方式參與肝組織的損傷。如：腫瘤壞死因子（TNF-α）作為一種關(guān)鍵的炎性因子，不僅伴隨各種肝臟疾病的發(fā)生與發(fā)展，而且它的含量高低與肝臟疾病的嚴重程度呈正相關(guān)。同時，TNF-α 能直接通過介導(dǎo) TNF-R1 誘發(fā)肝細胞凋亡，或間接通過誘生多種細胞因子產(chǎn)生，并形成復(fù)雜的炎性因子網(wǎng)絡(luò)，加劇肝損傷的進展。另外，白介素 1（IL-1）也是一種較強的促炎因子，它可誘導(dǎo)中性粒細胞和血管內(nèi)皮細胞表達黏附分子，并引發(fā)其他炎性因子的分泌，進而參與炎性反應(yīng)。其次，IL-6 的生物學(xué)活性廣泛，能促進 B 細胞的增殖分化并產(chǎn)生抗體，增多免疫復(fù)合物的形成，并引起炎癥反應(yīng)和靶細胞的損傷�？傊�，這些炎性因子的過多產(chǎn)生會加重肝臟病理組織損傷。大量文獻報道，多種信號分子的激活（包括 NF-κB，MAPK 和 Txnip/NLRP3 炎性小體）參與炎癥反應(yīng)，在肝損傷中發(fā)揮著十分重要的作用。 自噬是一種分解代謝溶酶體降解過程，最早由 de Duve 和 Wattianux 在 50 年前發(fā)現(xiàn)于肝臟中。目前已發(fā)現(xiàn) 30 多個自噬相關(guān)（Atg）基因，它們通過多種信號通路調(diào)控自噬過程。在這個過程中，Beclin-1 結(jié)合于分隔膜，主要負責(zé)募集Atg 家族蛋白，使 Atg12-Atg5-Atg16 復(fù)合物形成，進而促進前自噬泡形成；進一步募集 LC3-II 結(jié)合到分隔膜， 加速自噬體外膜的延展擴張，導(dǎo)致Atg12-Atg5-Atg16 復(fù)合物的脫落，促進成熟自噬體形成；自噬激活時 LC3-I型迅速轉(zhuǎn)化為 II 型，并定位于前自噬體和自噬體，在其他 Atg 脫落后，成為自噬體形成的標志性分子。一旦自噬體與溶酶體融合，自噬體內(nèi)的 LC3-II 即被溶酶體中的水解酶降解。另外，AMPK 和 mTOR 激酶也是自噬的關(guān)鍵調(diào)控分子。目前，越來越多的證據(jù)支持自噬和細胞死亡之間的交叉作用。在應(yīng)激反應(yīng)中，細胞利用自噬作為一種生存機制，在饑餓過程中產(chǎn)生營養(yǎng)物質(zhì)，消滅入侵的病原體，清除受損的蛋白質(zhì)和細胞器，從而得以生存。在肝臟中，基礎(chǔ)自噬似乎是維持肝臟穩(wěn)態(tài)和細胞存活的關(guān)鍵，因為小鼠肝臟中 Atg5 或 Atg7 基因缺失導(dǎo)致細胞死亡增加，嚴重的肝腫大和肝損傷。 據(jù)大量研究表明，在急性肝損傷疾病的發(fā)生發(fā)展過程中，有多種信號通路直接或間接參與肝損傷的調(diào)節(jié)。其中主要的信號通路有 TLR4-MAPK/-NF-κB，Txnip，NLRP3 炎性小體和 Nrf2 等。 三、肝臟毒性體外評價方法 目前肝細胞毒性仍主要采用傳統(tǒng)的評價技術(shù)和手段，在靈敏度和特異性等方面均存在一定的缺陷。隨著3Rs（reduction、replacement、refinement）原則的實施，體外替代研究逐漸成為熱點。體外高通量研究與傳統(tǒng)的試驗方法比較，具有相對客觀性，能快速準確地對受試物的毒性進行篩選，節(jié)省人力并保障實驗動物的福利。歐洲替代方法驗證中心（European Centre for the Validation of Alternative Methods，ECVAM）等目前已建立了一些關(guān)于體外肝毒性的快速檢測方法，并成功應(yīng)用于1 000 多種化合物的快速篩選，準確性較高。金家金利用高內(nèi)涵篩選分析技術(shù)（high content screening，HCS）針對HepaG2 細胞的細胞數(shù)目、DNA 含量、總谷胱甘肽（glutathione，GSH）水平、ROS 活性氧簇（reactive oxidative species，ROS ） 水平及線粒體膜電位（ mitochondrialmembrane potential，MMP）等指標進行定量或定性檢測，經(jīng)比較與MTT 比色法結(jié)果基本一致。 線粒體是細胞能量代謝的主要細胞器，還能調(diào)控胞內(nèi)各種信號傳導(dǎo)。有研究表明線粒體是許多藥物毒性產(chǎn)生的靶點，藥物的不良反應(yīng)有可能與線粒體受損有直接或間接的關(guān)系。肝臟含有大量線粒體供應(yīng)其代謝所需能量，F(xiàn)DA等機構(gòu)也明確要求線粒體毒性應(yīng)納入藥物安全性評價中。我司以Hep G2細胞建立體外模型，檢測化合物對線粒體造成的毒性作用。 我們可進行大量化合物的高通量毒性篩選，為客戶高效可靠的化合物篩選服務(wù)。以下是肝毒性化合物Tamoxifen在肝細胞上作用的部分數(shù)據(jù)。 怎么圖片不能放在正文中，也沒看到其他地方放圖片的�。�！抱歉，里面涉及的流程圖與結(jié)果圖不知道咋放進來。 主要參考文獻： 1、《甘草查耳酮A對急性肝損傷的保護作用及其機制的研究》 呂紅明 2019年 2、《人源HepaRG 肝細胞毒性與遺傳毒性高通量篩選方法的初步建立》 文海若等 2017年 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
求助�。�！大佬救命！�。�
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
酰胺縮合
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
藥理學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有275人回復(fù)
-
南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院肖計生課題組招收博士生 （2026年入學(xué)）
已經(jīng)有2人回復(fù)
-
349藥學(xué)專碩105500求調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
藥學(xué)專碩調(diào)劑
已經(jīng)有2人回復(fù)
-
藥學(xué)學(xué)碩326求調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
105500藥學(xué)調(diào)劑，一志愿頂9，主持省級大創(chuàng)，實驗型SCI二作，四六級已過，雙國獎
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
求調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
藥理學(xué)、臨床藥學(xué)方向 調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
298求調(diào)劑一志愿中海洋
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 搶金幣啦！回帖就可以得到:
-
燕山大學(xué)機械工程學(xué)院Marian Wiercigroch院士團隊招收2026年博士2人，碩士15人
+1/91
-
招聘換能器工程師/聲學(xué)工程師�。。�
+1/83
-
西南石油大學(xué)2026年人工智能類博士招生1名
+5/40
-
河南大學(xué)張琳教授團隊招收博士研究生
+1/22
-
【碩士調(diào)劑招生】武漢科技大學(xué)招收材料、化工、環(huán)境、冶金類2026級碩士生
+1/11
-
【接收調(diào)劑】澳科大誠招2026年秋季碩士研究生（3月5日下午18:00截止）
+1/11
-
安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)許云輝教授課題組招收材料類、化工類、醫(yī)學(xué)類等工科專碩學(xué)碩考研調(diào)劑
+1/9
-
溫州大學(xué)王娟課題組招收2026年碩博生
+1/8
-
上海交通大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院張智濤課題組誠聘博士后
+1/8
-
尋合作：應(yīng)力腐蝕多尺度模擬
+1/8
-
人工智能300分 求調(diào)劑，有項目競賽經(jīng)歷，能寫代碼
+1/7
-
清華大學(xué)深圳國際研究生院張旻課題組招收2027級博士生_機械、儀器方向
+1/4
-
澳洲皇家墨爾本理工RMIT招收【AI隱私安全， 隱私計算方向】 CSC訪問學(xué)者 聯(lián)合培養(yǎng)
+1/4
-
海南大學(xué)-國家級人才團隊 招2026級全日制碩士研究生
+1/2
-
智能電網(wǎng)與AI4Energy｜港科大（廣州）博士招生
+1/2
-
深圳大學(xué)何傳新課題組誠聘博士后、（副）研究員
+1/2
-
【研究生調(diào)劑招生】北京高校副校長團隊招收機械類，環(huán)境類學(xué)碩和專碩
+1/2
-
北京理工大學(xué)（珠海校區(qū)）何治宇教授團隊招收26級博士生1 名 （第二批）
+1/2
-
11408 372分 求調(diào)劑 有頂會論文國創(chuàng)競賽六級
+1/1
-
福建理工大學(xué)材料學(xué)院招收2026年學(xué)碩調(diào)劑
+1/1
★
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
2樓2020-11-20 15:01:38
5樓2020-11-21 07:11:52
16樓2020-11-23 09:03:47
19樓2020-12-12 11:12:11
簡單回復(fù)
tzynew3樓
2020-11-20 17:37
回復(fù)
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
2020-11-20 21:53
回復(fù)
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
my小木蟲6樓
2020-11-21 07:50
回復(fù)
icanspll7樓
2020-11-21 14:00
回復(fù)
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
。 發(fā)自小木蟲Android客戶端
yaqianye8樓
2020-11-21 14:00
回復(fù)
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
。 發(fā)自小木蟲Android客戶端
蓉蓉番薯9樓
2020-11-21 14:00
回復(fù)
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
。 發(fā)自小木蟲Android客戶端
zzhello10樓
2020-11-21 14:00
回復(fù)
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
。 發(fā)自小木蟲Android客戶端
likecitywo11樓
2020-11-21 14:01
回復(fù)
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
。 發(fā)自小木蟲Android客戶端
Haibo_12樓
2020-11-21 14:03
回復(fù)
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
。 發(fā)自小木蟲Android客戶端
howtoge13樓
2020-11-21 14:04
回復(fù)
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
。 發(fā)自小木蟲Android客戶端
shehuifei14樓
2020-11-21 14:04
回復(fù)
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
。 發(fā)自小木蟲Android客戶端
gofast11215樓
2020-11-21 14:09
回復(fù)
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
。 發(fā)自小木蟲Android客戶端
psylhh17樓
2020-11-25 23:49
回復(fù)
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
1
蘇州華博18樓
2020-11-27 10:46
回復(fù)
開水中游泳(金幣+1): 謝謝參與
1
yuanbingzhan20樓
2020-12-15 22:12
回復(fù)
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 開水中游泳 的主題更新
| 20 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 化學(xué) 0703求調(diào)劑 總分293 一志愿211 +6 | 土土小蟲 2026-03-03 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +4 | G212 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +3 | 咕嚕咕嚕123123 2026-03-02 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +4 | Afy123456 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[基金申請] 沒有青基直接申請面上，感覺自己瘋了 +5 | kevin63t 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0805總分292，求調(diào)劑 +12 | 幻想之殤 2026-03-01 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 一志愿東北大學(xué)化學(xué)314分求調(diào)劑 +5 | lr1212.. 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研]
材料270求調(diào)劑
6+6
|
Eiiiio 2026-03-01 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +3 | 滿天星11_22 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 284求調(diào)劑 +6 | 天下熯 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料類考研調(diào)劑 +6 | gemmgemm 2026-03-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 271求調(diào)劑 +4 | Ricardo1113 2026-03-02 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | repeatt?t 2026-02-28 | 7/350 |
|
|
|
[考博] 博士自薦 +4 | kkluvs 2026-02-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 265分求調(diào)劑不調(diào)專業(yè)和學(xué)校有行學(xué)上就 +6 | 禮堂丁真258 2026-02-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 264求調(diào)劑 +4 | 巴拉巴拉根556 2026-02-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +3 | L-xin? 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[碩博家園] 博士自薦 +7 | 科研狗111 2026-02-26 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +3 | Y墨明棋妙Y 2026-02-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +6 | 亭亭亭01 2026-03-01 | 6/300 |
|