 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1899 | 回復(fù): 3 | |||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者LiZhouya將贈(zèng)送您 5 個(gè)金幣 | |||
LiZhouya新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
RNA提取/蛋白提取
|
||
|
大家好，我有以下問題想向大家求助一下： 1、用來(lái)提取RNA或者蛋白的小鼠皮膚組織，由于樣本量較大，取樣之后，放在冰上，過(guò)了幾個(gè)小時(shí)之后才放到-80℃保存，這樣的情況下，對(duì)提取RNA或者蛋白會(huì)有影響嗎？ 2、組織需要用PBS清洗之后再放進(jìn)EPP管中嗎？如果需要，PBS的殘留會(huì)對(duì)提取目標(biāo)產(chǎn)物有影響嗎？（液氮研磨+TRIzol 法提取RNA） 3、液氮研磨的時(shí)間最好控制在多久之內(nèi)呢？ 4、之前提取的RNA基本都只有5S位置的條帶，請(qǐng)問都有哪些問題會(huì)造成這樣的影響呢？ 11111.png |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
推薦一些20種氨基酸檢測(cè)的實(shí)際應(yīng)用案例
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有160人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
atikou
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 74.9
- 帖子: 96
- 在線: 18.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 22783210
- 注冊(cè): 2020-06-10
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
|
第一，會(huì)有很大的影響，因?yàn)楸臏囟仍?℃以上，這個(gè)溫度可能組織里面的RNA水解酶和蛋白酶都能繼續(xù)發(fā)揮作用，導(dǎo)致樣本降解，取樣時(shí)可以將樣本放在干冰上面，干冰的溫度為-50℃左右。第二，剛?cè)〕鰜?lái)的組織要盡快的使用PBS洗滌，將組織表面的血液，和脂肪去出干凈。然后馬上凍存。PBS對(duì)于最后的提取結(jié)果沒有影響。第三，液氮研磨，你只要研磨成粉末狀，且保證組織的溫度不會(huì)上升上去，時(shí)間沒有太多的要求，只有盡快。第四，只有5s，說(shuō)明你的RNA嚴(yán)重降解了，原因就是前面的過(guò)程沒有處理好，例如取組織的時(shí)間太長(zhǎng)，研磨的時(shí)候沒有控制好溫度。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2021-09-05 15:35:41
atikou
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 74.9
- 帖子: 96
- 在線: 18.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 22783210
- 注冊(cè): 2020-06-10
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
|
第一，會(huì)有很大的影響，因?yàn)楸臏囟仍?℃以上，這個(gè)溫度可能組織里面的RNA水解酶和蛋白酶都能繼續(xù)發(fā)揮作用，導(dǎo)致樣本降解，取樣時(shí)可以將樣本放在干冰上面，干冰的溫度為-50℃左右。第二，剛?cè)〕鰜?lái)的組織要盡快的使用PBS洗滌，將組織表面的血液，和脂肪去出干凈。然后馬上凍存。PBS對(duì)于最后的提取結(jié)果沒有影響。第三，液氮研磨，你只要研磨成粉末狀，且保證組織的溫度不會(huì)上升上去，時(shí)間沒有太多的要求，只有盡快。第四，只有5s，說(shuō)明你的RNA嚴(yán)重降解了，原因就是前面的過(guò)程沒有處理好，例如取組織的時(shí)間太長(zhǎng)，研磨的時(shí)候沒有控制好溫度。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2021-09-05 15:36:24
atikou
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 74.9
- 帖子: 96
- 在線: 18.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 22783210
- 注冊(cè): 2020-06-10
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
|
第一，會(huì)有很大的影響，因?yàn)楸臏囟仍?℃以上，這個(gè)溫度可能組織里面的RNA水解酶和蛋白酶都能繼續(xù)發(fā)揮作用，導(dǎo)致樣本降解，取樣時(shí)可以將樣本放在干冰上面，干冰的溫度為-50℃左右。第二，剛?cè)〕鰜?lái)的組織要盡快的使用PBS洗滌，將組織表面的血液，和脂肪去出干凈。然后馬上凍存。PBS對(duì)于最后的提取結(jié)果沒有影響。第三，液氮研磨，你只要研磨成粉末狀，且保證組織的溫度不會(huì)上升上去，時(shí)間沒有太多的要求，只有盡快。第四，只有5s，說(shuō)明你的RNA嚴(yán)重降解了，原因就是前面的過(guò)程沒有處理好，例如取組織的時(shí)間太長(zhǎng)，研磨的時(shí)候沒有控制好溫度。------來(lái)自易基因的回答 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2021-09-05 15:36:49
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 LiZhouya 的主題更新
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考博] 26申博 +5 | north， 2026-02-28 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 080500材料科學(xué)與工程 +5 | 202114020319 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085601 材料305分求助 +3 | 泡泡郵件 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
[考研] 085600求調(diào)劑 +4 | LRZZZZZZ 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 347求調(diào)劑 +3 | 啊歐歐歐 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +3 | 咕嚕咕嚕123123 2026-03-02 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0854總分272 +5 | 打小就是老實(shí)人 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 0703化學(xué)學(xué)碩 288分
+4
|
旅行中的紫葡萄 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0856材料工程，初試313調(diào)劑 +7 | 賣個(gè)關(guān)子吧 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085700資環(huán)求調(diào)劑，初始279，六級(jí)已過(guò)，英語(yǔ)能力強(qiáng) +3 | 085700資環(huán)調(diào)劑 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 266材料化工求調(diào)劑 +3 | 哇塞王帥 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +11 | yunziaaaaa 2026-03-01 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑285 +11 | 呂仔龍 2026-02-28 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 材料復(fù)試調(diào)劑 +5 | 學(xué)材料的點(diǎn) 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿東北大學(xué)材料專碩328，求調(diào)劑 +3 | shs1083 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工328求調(diào)劑 +3 | 。，。，。，。i 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 此成果不能導(dǎo)入原因：元數(shù)據(jù)必填信息不完整，可 進(jìn)行補(bǔ)充。 +4 | Kittylucky 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 264求調(diào)劑 +4 | 巴拉巴拉根556 2026-02-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +3 | 熊境喆 2026-03-01 | 3/150 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)]
剛錄用，沒有期刊號(hào)，但是在線可看的論文可以放為代表作嗎
 10+3
|
arang1 2026-03-01 | 3/150 |
|