 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 7249 | 回復: 15 | ||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
漁人圖圖新蟲 (小有名氣)
|
[求助]
求教！急！qPCR內(nèi)參Ct值高至35！但之前同樣的手法都能跑出來Ct18-19！ 已有1人參與
|
|
|
最近提取小鼠肝細胞AML12的RNA 進行逆轉(zhuǎn)，之后熒光實時PCR。在居家辦公之前，內(nèi)參MPPIA的Ct值有18-19左右，target gene大概26-28左右，都有比較好的擴增曲線和溶解曲線。但是自復工以來，同樣提取得到的RNA，逆轉(zhuǎn)之后跑實時PCR，內(nèi)參MPPIA的Ct值都已經(jīng)33以上，甚至高于35，或壓根undetermined；target gene全部都是undetermined，溶解曲線根本不規(guī)則。 同樣的手法，同樣的Trizol提取方式，實在不知道是怎么回事了。目前出現(xiàn)這種情況已經(jīng)三次，用別人的RNA sample可以跑出內(nèi)參及target gene。所以懷疑是RNA樣品出問題，但是今天又一次仔仔細細用Trizol提取RNA，包括*頭重新滅菌，所用試劑全部換新的，再三確定無誤，結(jié)果依舊不行，內(nèi)參已經(jīng)30好幾，target gene依然undetermined。注：RNA濃度有300ng/ul左右（溶于20ulDEPC），260/280有1.8左右。 已經(jīng)3次了。。同實驗室的前輩也不知道是什么原因?qū)е隆�。希望大神們能指點一二�。“葜x！@biostar2009@biostar2009@wizardfan@飛約瘋?cè)嗽?/u> |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有183人回復
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
QBLiqibing
金蟲 (正式寫手)
- 應助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1423.7
- 紅花: 2
- 帖子: 584
- 在線: 54.1小時
- 蟲號: 3158410
- 注冊: 2014-04-23
- 性別: GG
- 專業(yè): 細胞信號轉(zhuǎn)導
9樓2020-05-10 11:32:32
2樓2020-05-09 07:51:34
漁人圖圖
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 79.7
- 帖子: 54
- 在線: 50.1小時
- 蟲號: 4101918
- 注冊: 2015-09-25
- 專業(yè): 細胞信號轉(zhuǎn)導
3樓2020-05-09 13:09:49
owl2010
金蟲 (正式寫手)
- 應助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 2619.7
- 散金: 608
- 紅花: 24
- 帖子: 433
- 在線: 700.1小時
- 蟲號: 1338696
- 注冊: 2011-07-06
- 性別: GG
- 專業(yè): 林木遺傳育種學
4樓2020-05-09 14:25:50
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研]
 調(diào)劑的同學，走過路過，不要錯過
+9
|
likeihood 2026-03-06 | 14/700 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿華中科大0702，數(shù)一英一，293 +3 | 小羅露一二 2026-03-07 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專碩323求調(diào)劑 +5 | 李白26 2026-03-07 | 5/250 |
|
|
|
[考博] 申博 +3 | 添菜了哈 2026-03-04 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +7 | 倘若起風了呢 2026-03-05 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 哈爾濱理工大學2026年研究生調(diào)劑，材料科學與化學工程學院研究生調(diào)劑 +3 | xinliu866 2026-03-06 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 290分材料工程085601求調(diào)劑 數(shù)二英一 +9 | llx0610 2026-03-02 | 10/500 |
|
|
|
[考研]
材料工程調(diào)劑
+6
|
zbcm_zbcm 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 280分 +13 | yyqqhh 2026-03-03 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +4 | 劉合華 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 332材料求調(diào)劑 +6 | zjy101327 2026-03-05 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑 +6 | vuzhdkfjkx 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 334求調(diào)劑 +3 | Trying] 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 學碩材料275調(diào)劑 +9 | 路三三 2026-03-03 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0857求調(diào)劑 +4 | CDDD1013 2026-03-04 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 281求調(diào)劑 +3 | Y?l?h 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
 0703化學學碩 288分
+4
|
旅行中的紫葡萄 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
計算機學碩 分數(shù)285求調(diào)劑
+4
|
glwshine 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 26考研報考西工大材料308分求調(diào)劑 +4 | weizhong123 2026-03-01 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 261求調(diào)劑 +3 | 陸lh 2026-03-01 | 3/150 |
|