 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 7253 | 回復: 15 | |||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
漁人圖圖新蟲 (小有名氣)
|
[求助]
求教！急！qPCR內(nèi)參Ct值高至35！但之前同樣的手法都能跑出來Ct18-19！ 已有1人參與
|
||
|
最近提取小鼠肝細胞AML12的RNA 進行逆轉(zhuǎn)，之后熒光實時PCR。在居家辦公之前，內(nèi)參MPPIA的Ct值有18-19左右，target gene大概26-28左右，都有比較好的擴增曲線和溶解曲線。但是自復工以來，同樣提取得到的RNA，逆轉(zhuǎn)之后跑實時PCR，內(nèi)參MPPIA的Ct值都已經(jīng)33以上，甚至高于35，或壓根undetermined；target gene全部都是undetermined，溶解曲線根本不規(guī)則。 同樣的手法，同樣的Trizol提取方式，實在不知道是怎么回事了。目前出現(xiàn)這種情況已經(jīng)三次，用別人的RNA sample可以跑出內(nèi)參及target gene。所以懷疑是RNA樣品出問題，但是今天又一次仔仔細細用Trizol提取RNA，包括*頭重新滅菌，所用試劑全部換新的，再三確定無誤，結(jié)果依舊不行，內(nèi)參已經(jīng)30好幾，target gene依然undetermined。注：RNA濃度有300ng/ul左右（溶于20ulDEPC），260/280有1.8左右。 已經(jīng)3次了。。同實驗室的前輩也不知道是什么原因?qū)е隆�。希望大神們能指點一二啊！拜謝！@biostar2009@biostar2009@wizardfan@飛約瘋?cè)嗽?/u> |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有90人回復
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
pennchem
專家顧問 (正式寫手)
-
專家經(jīng)驗: +21 - MolEPI: 1
- 應助: 297 (大學生)
- 金幣: 10474
- 散金: 65
- 紅花: 28
- 帖子: 596
- 在線: 1101小時
- 蟲號: 2139205
- 注冊: 2012-11-21
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
- 管轄: 生物科學
5樓2020-05-09 15:05:04
2樓2020-05-09 07:51:34
漁人圖圖
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 79.7
- 帖子: 54
- 在線: 50.1小時
- 蟲號: 4101918
- 注冊: 2015-09-25
- 專業(yè): 細胞信號轉(zhuǎn)導
3樓2020-05-09 13:09:49
owl2010
金蟲 (正式寫手)
- 應助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 2619.7
- 散金: 608
- 紅花: 24
- 帖子: 433
- 在線: 700.1小時
- 蟲號: 1338696
- 注冊: 2011-07-06
- 性別: GG
- 專業(yè): 林木遺傳育種學
4樓2020-05-09 14:25:50
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[基金申請]
PDF在線壓縮軟件
 10+3
|
haxia 2026-03-08 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +4 | 超級伊昂大王 2026-03-10 | 4/200 |
|
|
[考研] 0817化學工程319求調(diào)劑 +7 | lv945 2026-03-08 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程295求調(diào)劑，一志愿A區(qū)211 +8 | 等春來， 2026-03-06 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0856材料與化工353分求調(diào)劑 +5 | NIFFFfff 2026-03-09 | 5/250 |
|
|
|
[考研]
 295復試調(diào)劑
+4
|
簡木ChuFront 2026-03-09 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +4 | 調(diào)劑的考研學生 2026-03-09 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學求調(diào)劑 +4 | 很老實人 2026-03-09 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 2026考研求調(diào)劑-材料類-本科211一志愿985-初試301分 +7 | 蟲友233 2026-03-07 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 理學287分求調(diào)劑 +4 | 看看我. 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +11 | 朝天椒的雙馬尾 2026-03-05 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +7 | ounce. 2026-03-05 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 一志愿南京大學資源與環(huán)境專業(yè)283分求調(diào)劑 +8 | 追云?? 2026-03-04 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +4 | L9370 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理085601專碩347分求調(diào)劑 +4 | 啊歐歐歐 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 274環(huán)境工程求調(diào)劑 +6 | 扶柳盈江 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 22408-273求調(diào)劑-擔任3個項目的負責人-1篇國際期刊論文（一作）1篇核心期刊論文在投。 +3 | 沒想好取什么名 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學求調(diào)劑，總分320分，一志愿中南民族大學 +3 | 19286712440 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 能動297求調(diào)劑，本科川大 +4 | 邵11 2026-03-04 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 322,求調(diào)劑 +3 | 菜菜愛玩 2026-03-04 | 3/150 |
|