 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 2/1 | 返回列表 |
| 查看: 3751 | 回復: 27 | |||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
coostudent銅蟲 (小有名氣)
|
[交流]
2kb片段插入總是失敗，搞了半年了，求前輩拯救
|
||
|
2kb片段插入質(zhì)粒xbaI位點，酶切酶連還有in-fusion的方法都試過了，但是最終挑不到陽性克隆。搞了半年了，感覺就是個簡單的酶切酶連操作，但就是搞不定，心累，想哭，求拯救！ 除了質(zhì)粒，相關的材料都換過了。質(zhì)粒也對酶切位點周圍測了序，沒有問題，理論上也不會發(fā)生甲基化…… 質(zhì)粒是鏈霉菌基因編輯的商業(yè)化質(zhì)粒pCRISPomyces-2 酶切位點XbaI 如需更詳細線索 我會在后面補充 或者有做過相關試驗的小伙伴嗎，求指點！ 多謝！ 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
回復此樓» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
MerlingMay» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有296人回復
-
蛋白質(zhì)檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關商家推薦: (我也要在這里推廣)
MerlingMay
新蟲 (初入文壇)
- 應助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 22.3
- 散金: 10
- 帖子: 42
- 在線: 8.5小時
- 蟲號: 15854823
- 注冊: 2019-08-06
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物物理、生物化學與分子
17樓2020-05-04 17:20:00
ULYSSEESWB
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- 應助: 39 (小學生)
- 金幣: 7653.9
- 散金: 2508
- 紅花: 7
- 帖子: 596
- 在線: 1088.8小時
- 蟲號: 939000
- 注冊: 2010-01-08
- 專業(yè): 藥理學其他科學問題
★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2020-01-18 20:29:13
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2020-01-18 20:29:13
| in-fusion也失�。吭O置過陽性對照么？載體自連？試試pcr線性化載體 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
2樓2020-01-02 13:15:50
3樓2020-01-02 13:29:17
★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2020-01-18 20:29:22
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2020-01-18 20:29:22
| 實在不行試試雙酶切吧，我們實驗室基本都是雙酶切。酶切連接失敗我首先會檢查擴增片段的引物上是否有相應的酶切位點及保護堿基；其次是質(zhì)粒上確實具有這兩個酶切位點序列（一定要在質(zhì)粒上搜到相應的序列，有些質(zhì)粒圖譜畫的不靠譜）。最后考慮試劑是否過期。祝你好運 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
4樓2020-01-02 19:49:06
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿中國石油大學（華東） 本科齊魯工業(yè)大學 求調(diào)劑 +3 | snw石 2026-03-07 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 誠求調(diào)劑，323分 有專利/科研/實習經(jīng)歷 +6 | 橙子cyx 2026-03-06 | 8/400 |
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +3 | 一二LV 2026-03-07 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703求調(diào)劑 +4 | c297914 2026-03-06 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +5 | Gale1314 2026-03-06 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 08工科求調(diào)劑 +3 | 隆LLL 2026-03-06 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +4 | 劉合華 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 332材料求調(diào)劑 +6 | zjy101327 2026-03-05 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑 +5 | ws 上岸鴨 2026-03-05 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +4 | 李LJR 2026-03-04 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +10 | 鹿沫笙 2026-03-02 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 320材料一志愿西工大專碩英二數(shù)二 有兩年光伏工作經(jīng)驗 +5 | 錘某人 2026-03-04 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +4 | xuyuan111 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085600 材料與化工 298 +14 | 小西笑嘻嘻 2026-03-03 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 一志愿314求調(diào)劑 +7 | 202111120625 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿西交大材料學碩 346 求調(diào)劑 +3 | zju51 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085600求調(diào)劑 +4 | LRZZZZZZ 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 化工270求調(diào)劑 +10 | 什么名字qwq 2026-03-02 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 化學0703求調(diào)劑 學碩 理/工科均可 總分279 +3 | 1一11 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +3 | MuoLuo1312 2026-03-02 | 6/300 |
|