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婉柳新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
膠回收沒(méi)有條帶 已有3人參與
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膠回收的時(shí)候，用的是1％的瓊脂糖凝膠電泳，0.2g瓊脂糖，20mlTBE，用一厘米左右的梳子。上樣的時(shí)候，上樣量20微升，配1微升loading buffer，按試劑盒上操作的，回收后，沒(méi)有條帶。是不是buffer太少了，上樣量了不夠，濃度太低了？還有在紫外燈下切膠時(shí)間有3-4分鐘，時(shí)間太長(zhǎng)是不是也有影響？還有其他什么原因，分析不出來(lái)了，請(qǐng)各位老師，大神指教 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
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loading buffer 按照說(shuō)明書(shū)指導(dǎo)來(lái)，另外大孔膠可以加樣50ul 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
4樓2019-12-29 19:30:34
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-12-29 22:08:36
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西門(mén)吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-12-29 22:08:36
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一個(gè)孔太少了，本來(lái)膠回收率就10%左右，多上樣幾個(gè)孔回收就好了 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
2樓2019-12-29 18:35:54
婉柳
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明天試試多加幾個(gè)孔。如果想省點(diǎn)事的話，一個(gè)空最多可以加多少量的樣，把pcr產(chǎn)物混合均勻，加到一個(gè)孔里，可以么？另外，一個(gè)孔里加多少微升loadong buffer合適？ 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
3樓2019-12-29 19:26:15
婉柳
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我從來(lái)沒(méi)見(jiàn)過(guò)loading buffer的說(shuō)明書(shū)，明天去好好找找。1㎝左右的孔，加樣50微升的話，用多少buffer合適 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
5樓2019-12-29 19:35:08
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