| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2165 | 回復(fù): 10 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖,點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
mosaki銅蟲 (初入文壇)
|
[求助]
PCR如何入門 已有3人參與
|
||
|
大家好,小木蟲小白上來發(fā)帖,求助各位大神。 我是學(xué)中藥的,沒有生物基礎(chǔ),最近因?yàn)榻拥巾?xiàng)目開始做植物DNA提取,PCR反應(yīng)和酶切再跑膠,跑出來的膠真是一塌糊涂,求問各位,有什么書/刊物/方法能夠自學(xué)提升PCR和跑膠水平? |
木蟲 (正式寫手)
PCR這個說簡單也簡單,說復(fù)雜也挺復(fù)雜的,我沒有專門學(xué)過PCR相關(guān)知識,做的也就是普通PCR,遇到問題也是從網(wǎng)上查查相關(guān)原因(其實(shí)也沒遇到過太大的問題。。。。。。),不過入門的話我覺得你應(yīng)該先查一下PCR原理,知道PCR是什么,也就知道每一步的意義了,然后就是模板、引物設(shè)計(jì)、擴(kuò)增程序這一塊吧,模板這塊現(xiàn)在的試劑盒感覺都不太差,按說明書操作一般問題都不大的(制備模板樣本太刁難除外。,引物的話網(wǎng)上也有很多引物設(shè)計(jì)的方法和注意事項(xiàng),我覺得模板質(zhì)量沒問題,引物只要二聚體,錯配什么的不要太過分(主要是3'端盡量不要有錯配),一般都沒問題的,擴(kuò)增程序這塊,你用的酶說明書上都有參考程序的,退火溫度我覺小范圍內(nèi)變化對擴(kuò)增結(jié)果影響不會太大,另外延伸的時(shí)間一定要夠啊,別說明書1000-2000bp/min就按2000走了,時(shí)間稍微寬裕點(diǎn)。另外跑膠不太好,如果是根本沒擴(kuò)出條帶就算了,如果marker都沒跑好,那肯定就是膠的問題了。我覺得PCR這個多做幾次,遇到問題解決問題,慢慢就有經(jīng)驗(yàn)了。不過樓主專門找PCR相關(guān)的書籍去學(xué)習(xí)挺好的,我也想過看書的,最終沒看下去 ,以上廢話挺多的,樓主覺得有用的就參考,覺得沒用的就隨便看看。。。 |
木蟲 (正式寫手)
銅蟲 (初入文壇)
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0703求調(diào)劑 +6 | jtyq001 2026-03-10 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0856化工原理 +5 | z2839474511 2026-03-10 | 5/250 |
|
|
[考研] 337一志愿華南理工0805材料求調(diào)劑 +3 | mysdl 2026-03-11 | 5/250 |
|
|
[考研] 泣血叩求調(diào)劑恩,愿以丹心報(bào)師恩 +5 | Iuruoh 2026-03-11 | 5/250 |
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 鶴遨予卿 2026-03-09 | 4/200 |
|
|
[考研] 420求調(diào)劑 +3 | 莫向外求11 2026-03-10 | 3/150 |
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +3 | Vv呀! 2026-03-10 | 3/150 |
|
|
[考研] 0860求調(diào)劑(272分) +3 | lllllcsjsj 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
[考研] 材料專碩調(diào)劑 +7 | 慕辰123 2026-03-05 | 10/500 |
|
|
[碩博家園] 2026級碩士研究生招生/調(diào)劑 +3 | 知足常樂的樂 2026-03-06 | 5/250 |
|
|
[考研] 320求調(diào)劑 +4 | 魏zy 2026-03-08 | 4/200 |
|
|
[考研] 考研調(diào)劑,一志愿山東大學(xué)材料與化工,328分,政治51 +5 | 關(guān)你西紅柿929 2026-03-08 | 6/300 |
|
|
[考研] 求調(diào)劑,一志愿華中科大0702,數(shù)一英一,293 +4 | 小羅露一二 2026-03-07 | 4/200 |
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程317分求調(diào)劑 +9 | 6汆尼9 2026-03-07 | 9/450 |
|
|
[考研] 0307化學(xué)求調(diào)劑 +6 | 0ok0k 2026-03-07 | 6/300 |
|
|
[考研] 一志愿武漢理工085601,初試301分,請問能調(diào)劑到湖北嗎 +3 | 肖yang 2026-03-06 | 3/150 |
|
|
[考研] 材料專碩323求調(diào)劑 +5 | 李白26 2026-03-07 | 5/250 |
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +4 | 52hz~~ 2026-03-05 | 5/250 |
|
|
[考研] 271求調(diào)劑 +7 | 月色c 2026-03-05 | 8/400 |
|
|
[考研] 紡織、生物、化學(xué)、材料等專業(yè) +3 | Eember. 2026-03-05 | 7/350 |
|