 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2166 | 回復(fù): 10 | |||
mosaki銅蟲 (初入文壇)
|
[求助]
PCR如何入門 已有3人參與
|
||
|
大家好，小木蟲小白上來發(fā)帖，求助各位大神。 我是學(xué)中藥的，沒有生物基礎(chǔ)，最近因?yàn)榻拥巾?xiàng)目開始做植物DNA提取，PCR反應(yīng)和酶切再跑膠，跑出來的膠真是一塌糊涂，求問各位，有什么書/刊物/方法能夠自學(xué)提升PCR和跑膠水平？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有55人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
cry_2013
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 47 (小學(xué)生)
- 金幣: 1960.8
- 散金: 342
- 紅花: 6
- 帖子: 366
- 在線: 246.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 3426497
- 注冊(cè): 2014-09-18
- 性別: MM
- 專業(yè): 獸醫(yī)傳染病學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
PCR這個(gè)說簡(jiǎn)單也簡(jiǎn)單，說復(fù)雜也挺復(fù)雜的，我沒有專門學(xué)過PCR相關(guān)知識(shí)，做的也就是普通PCR，遇到問題也是從網(wǎng)上查查相關(guān)原因（其實(shí)也沒遇到過太大的問題。。。。。。），不過入門的話我覺得你應(yīng)該先查一下PCR原理，知道PCR是什么，也就知道每一步的意義了，然后就是模板、引物設(shè)計(jì)、擴(kuò)增程序這一塊吧，模板這塊現(xiàn)在的試劑盒感覺都不太差，按說明書操作一般問題都不大的（制備模板樣本太刁難除外�。锏脑捑W(wǎng)上也有很多引物設(shè)計(jì)的方法和注意事項(xiàng)，我覺得模板質(zhì)量沒問題，引物只要二聚體，錯(cuò)配什么的不要太過分（主要是3'端盡量不要有錯(cuò)配），一般都沒問題的，擴(kuò)增程序這塊，你用的酶說明書上都有參考程序的，退火溫度我覺小范圍內(nèi)變化對(duì)擴(kuò)增結(jié)果影響不會(huì)太大，另外延伸的時(shí)間一定要夠啊，別說明書1000-2000bp/min就按2000走了，時(shí)間稍微寬裕點(diǎn)。另外跑膠不太好，如果是根本沒擴(kuò)出條帶就算了，如果marker都沒跑好，那肯定就是膠的問題了。我覺得PCR這個(gè)多做幾次，遇到問題解決問題，慢慢就有經(jīng)驗(yàn)了。不過樓主專門找PCR相關(guān)的書籍去學(xué)習(xí)挺好的，我也想過看書的，最終沒看下去 ，以上廢話挺多的，樓主覺得有用的就參考，覺得沒用的就隨便看看。。。 |
8樓2019-03-15 14:26:16
lizimu566
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 21 (小學(xué)生)
- 金幣: 1834.1
- 散金: 14
- 紅花: 4
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 606
- 在線: 114.8小時(shí)
- 蟲號(hào): 4221341
- 注冊(cè): 2015-11-15
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2019-03-13 16:11:19
 本帖僅樓主可見 |
3樓2019-03-13 18:46:56
mosaki
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 73.3
- 帖子: 18
- 在線: 3.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 4021834
- 注冊(cè): 2015-08-14
- 專業(yè): 中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)
4樓2019-03-13 19:36:49
 |
5樓2019-03-14 09:05:02
6樓2019-03-14 11:04:36
mosaki
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 73.3
- 帖子: 18
- 在線: 3.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 4021834
- 注冊(cè): 2015-08-14
- 專業(yè): 中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)
7樓2019-03-14 11:20:24
旭日讀書
鐵桿木蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 13085.5
- 散金: 285
- 紅花: 4
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 2392
- 在線: 674小時(shí)
- 蟲號(hào): 3998838
- 注冊(cè): 2015-07-31
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
|
我本科也是中藥的，碩士剛剛進(jìn)實(shí)驗(yàn)室沒人教做分子生物學(xué)也是一塌糊涂，馬上研三畢業(yè)，熬過去回過頭來看，這一行真的是門檻相當(dāng)?shù)偷牧�。有熟人帶一個(gè)星期我覺得就夠了，多多請(qǐng)假會(huì)的人。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2020-03-18 13:53:16
匿名
用戶注銷 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 128 (高中生)
- 金幣: 4550.4
- 散金: 50
- 紅花: 22
- 帖子: 934
- 在線: 645.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 0
- 注冊(cè): 2011-10-17
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物遺傳學(xué)
10樓2020-03-18 17:17:49
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 mosaki 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +6 | 邱gl 2026-03-10 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | 柯淮然 2026-03-10 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 081200計(jì)算機(jī)科學(xué)與技術(shù)數(shù)一英一306求調(diào)劑 +3 | intankt 2026-03-08 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研材料與化工，求調(diào)劑 +7 | 戲精丹丹丹 2026-03-09 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料調(diào)劑，307分 +12 | 張泳銘1 2026-03-09 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +5 | 呵唔哦豁 2026-03-10 | 5/250 |
|
|
|
[考博] 找博導(dǎo) +4 | 小呆呆熊 2026-03-07 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工 一志愿山大 321分 求調(diào)劑 +6 | 每天散步 2026-03-09 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 294 英二數(shù)二物化 求調(diào)劑 +6 | 米飯團(tuán)不好吃 2026-03-09 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +4 | 上班不著吉 2026-03-09 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 337求調(diào)劑 +3 | 睡醒，。 2026-03-09 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 269求調(diào)劑 +3 | 朔朔話 2026-03-08 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑085600材料與化工 +13 | Daunrin 2026-03-07 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 拾柒12。 2026-03-08 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 322分 085600求調(diào)劑，有互聯(lián)網(wǎng)+國(guó)金及主持省級(jí)大創(chuàng)經(jīng)歷 +4 | 熊境喆 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿211 化學(xué)305分求調(diào)劑 +3 | 0703楊悅305分 2026-03-05 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 2026調(diào)劑】考試A區(qū)0703化學(xué)類323分 誠(chéng)求接收 +3 | 卷柏卷柏 2026-03-05 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿哈爾濱工業(yè)大學(xué)0856材料與化工，前三科206，總分283，求調(diào)劑 +7 | 26考研求調(diào)劑 2026-03-06 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 287求調(diào)劑 +3 | 看看我. 2026-03-05 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 化工282求調(diào)劑一志愿211 +5 | NA0912 2026-03-05 | 6/300 |
|