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1207749239新蟲 (初入文壇)
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[交流]
PET-28a載體原核表達(dá) 已有3人參與
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各位同仁，老師，新年快到了，首先祝大家新年快樂。本人最近在做原核表達(dá)，有這樣一個(gè)疑問，我將我的外源基因插入PET-28a載體后，那么在翻譯的過程中自ATG-TGA，這個(gè)蛋白會(huì)有一段是來自載體上序列翻譯而來。那么問題來了，如果在插入外源基因的地方插入的是另外一個(gè)基因，翻譯而來的蛋白同樣會(huì)有一段來自載體序列，那么與上一個(gè)相比，會(huì)擁有一段相同的蛋白。如果我用其中的一個(gè)抗原的抗體去雜交另外一個(gè)抗原，是不是同樣能結(jié)合，出現(xiàn)雜交結(jié)果呢(因?yàn)閮煞N抗原是有一部分重疊的，而正是序列上翻譯而來的這一部分)。請(qǐng)問各位老師，同仁，會(huì)不會(huì)出現(xiàn)這種情況，求解惑，謝謝 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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1207749239
新蟲 (初入文壇)
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是的，因?yàn)樯唐坊目贵w是經(jīng)過優(yōu)化與選擇的。我所描述的問題是用我的自己表達(dá)的蛋白免疫的，而且做ELISA確實(shí)出現(xiàn)了這種問題，出現(xiàn)抗體交叉強(qiáng)陽(yáng)性 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
5樓2019-01-29 11:30:38
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-02-13 20:41:53
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-02-13 20:41:53
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我覺得，抗原表位是很小的一段，如果你的抗體是針對(duì)一個(gè)外源蛋白的，那應(yīng)該不會(huì)和另一個(gè)反應(yīng)，但如果是針對(duì)載體的序列的，那就會(huì)反應(yīng)了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2019-01-26 13:44:34
wuhu0612331
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-02-13 20:42:14
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西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-02-13 20:42:14
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簡(jiǎn)單回答如果你的抗體是針對(duì)你的第一個(gè)抗原，那么針對(duì)另外一個(gè)非同源抗原的可能性很小 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2019-01-26 18:28:58
a13515517892
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4樓2019-01-29 11:24:20
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