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1207749239新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
PET-28a載體原核表達(dá) 已有3人參與
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各位同仁,老師,新年快到了,首先祝大家新年快樂(lè)。本人最近在做原核表達(dá),有這樣一個(gè)疑問(wèn),我將我的外源基因插入PET-28a載體后,那么在翻譯的過(guò)程中自ATG-TGA,這個(gè)蛋白會(huì)有一段是來(lái)自載體上序列翻譯而來(lái)。那么問(wèn)題來(lái)了,如果在插入外源基因的地方插入的是另外一個(gè)基因,翻譯而來(lái)的蛋白同樣會(huì)有一段來(lái)自載體序列,那么與上一個(gè)相比,會(huì)擁有一段相同的蛋白。如果我用其中的一個(gè)抗原的抗體去雜交另外一個(gè)抗原,是不是同樣能結(jié)合,出現(xiàn)雜交結(jié)果呢(因?yàn)閮煞N抗原是有一部分重疊的,而正是序列上翻譯而來(lái)的這一部分)。請(qǐng)問(wèn)各位老師,同仁,會(huì)不會(huì)出現(xiàn)這種情況,求解惑,謝謝 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
銅蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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簡(jiǎn)單回答如果你的抗體是針對(duì)你的第一個(gè)抗原,那么針對(duì)另外一個(gè)非同源抗原的可能性很小 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
新蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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我覺(jué)得,抗原表位是很小的一段,如果你的抗體是針對(duì)一個(gè)外源蛋白的,那應(yīng)該不會(huì)和另一個(gè)反應(yīng),但如果是針對(duì)載體的序列的,那就會(huì)反應(yīng)了 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
木蟲(chóng) (小有名氣)
新蟲(chóng) (初入文壇)
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是的,因?yàn)樯唐坊目贵w是經(jīng)過(guò)優(yōu)化與選擇的。我所描述的問(wèn)題是用我的自己表達(dá)的蛋白免疫的,而且做ELISA確實(shí)出現(xiàn)了這種問(wèn)題,出現(xiàn)抗體交叉強(qiáng)陽(yáng)性 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
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