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[交流]
PET-28a載體原核表達 已有3人參與
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各位同仁,老師,新年快到了,首先祝大家新年快樂。本人最近在做原核表達,有這樣一個疑問,我將我的外源基因插入PET-28a載體后,那么在翻譯的過程中自ATG-TGA,這個蛋白會有一段是來自載體上序列翻譯而來。那么問題來了,如果在插入外源基因的地方插入的是另外一個基因,翻譯而來的蛋白同樣會有一段來自載體序列,那么與上一個相比,會擁有一段相同的蛋白。如果我用其中的一個抗原的抗體去雜交另外一個抗原,是不是同樣能結合,出現(xiàn)雜交結果呢(因為兩種抗原是有一部分重疊的,而正是序列上翻譯而來的這一部分)。請問各位老師,同仁,會不會出現(xiàn)這種情況,求解惑,謝謝 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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我覺得,抗原表位是很小的一段,如果你的抗體是針對一個外源蛋白的,那應該不會和另一個反應,但如果是針對載體的序列的,那就會反應了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
銅蟲 (正式寫手)
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簡單回答如果你的抗體是針對你的第一個抗原,那么針對另外一個非同源抗原的可能性很小 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
木蟲 (小有名氣)
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是的,因為商品化的抗體是經過優(yōu)化與選擇的。我所描述的問題是用我的自己表達的蛋白免疫的,而且做ELISA確實出現(xiàn)了這種問題,出現(xiàn)抗體交叉強陽性 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
木蟲 (小有名氣)
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