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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » PCR相關 » 膠回收沒有條帶
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婉柳新蟲 (小有名氣)
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[求助]
膠回收沒有條帶 已有3人參與
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膠回收的時候，用的是1％的瓊脂糖凝膠電泳，0.2g瓊脂糖，20mlTBE，用一厘米左右的梳子。上樣的時候，上樣量20微升，配1微升loading buffer，按試劑盒上操作的，回收后，沒有條帶。是不是buffer太少了，上樣量了不夠，濃度太低了？還有在紫外燈下切膠時間有3-4分鐘，時間太長是不是也有影響？還有其他什么原因，分析不出來了，請各位老師，大神指教 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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6樓2019-12-29 20:08:05
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【答案】應助回帖
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感謝參與，應助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2019-12-29 22:08:36
感謝參與，應助指數(shù) +1
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2019-12-29 22:08:36
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一個孔太少了，本來膠回收率就10%左右，多上樣幾個孔回收就好了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
2樓2019-12-29 18:35:54
婉柳
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明天試試多加幾個孔。如果想省點事的話，一個空最多可以加多少量的樣，把pcr產(chǎn)物混合均勻，加到一個孔里，可以么？另外，一個孔里加多少微升loadong buffer合適？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2019-12-29 19:26:15
淵博震天
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4樓2019-12-29 19:30:34
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