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lvjc9988新蟲 (初入文壇)
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[求助]
苯酚硫酸法測(cè)粗多糖
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 我們用的苯酚硫酸法：1.樣品處理：取均勻的待測(cè)樣品2.0g，置于100ml容量瓶中，加水80ml左右，于沸水浴上加熱2h，冷卻至室溫后補(bǔ)加水至刻度，混勻后，過(guò)濾，棄去初濾液，收集續(xù)濾液供沉淀多糖。 2.沉淀粗多糖：準(zhǔn)確吸取上一步續(xù)濾液5.0ml，置于50ml離心管中，加入污水乙醇20ml，混勻5min后，以3000r/min離心5min，棄去上清液。殘?jiān)?0%（體積分?jǐn)?shù)）乙醇溶液數(shù)毫升洗滌，離心后棄去上清夜，反復(fù)操作3-4次。殘?jiān)盟芙獠⒍ㄈ葜?.0ml，混勻后，供沉淀葡聚糖。 3.沉淀葡聚糖：準(zhǔn)確吸取第2步終溶液2ml，置于20ml離心管中，加入100g/L氫氧化鈉溶液2.0ml、銅試劑溶液2.0ml，沸水浴中煮沸2min，冷卻，以3000r/min離心5min，棄去上清液。殘?jiān)孟礈煲簲?shù)毫升洗滌，離心后棄去上清液，反復(fù)操作3次，殘?jiān)?0%（體積分?jǐn)?shù)）硫酸溶液2.0ml溶解并轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻，此液為樣品測(cè)定液體。 我們檢測(cè)時(shí)沉淀粗多糖一步中有較多沉淀，但在沉淀葡聚糖步驟中，離心后很少有沉淀。請(qǐng)各位老師指導(dǎo)一下，是方法有問(wèn)題還是操作有問(wèn)題呢，萬(wàn)分感謝！ |
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