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lvjc9988新蟲 (初入文壇)
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[求助]
苯酚硫酸法測粗多糖
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 我們用的苯酚硫酸法：1.樣品處理：取均勻的待測樣品2.0g，置于100ml容量瓶中，加水80ml左右，于沸水浴上加熱2h，冷卻至室溫后補加水至刻度，混勻后，過濾，棄去初濾液，收集續(xù)濾液供沉淀多糖。 2.沉淀粗多糖：準確吸取上一步續(xù)濾液5.0ml，置于50ml離心管中，加入污水乙醇20ml，混勻5min后，以3000r/min離心5min，棄去上清液。殘渣用80%（體積分數(shù)）乙醇溶液數(shù)毫升洗滌，離心后棄去上清夜，反復(fù)操作3-4次。殘渣用水溶解并定容至5.0ml，混勻后，供沉淀葡聚糖。 3.沉淀葡聚糖：準確吸取第2步終溶液2ml，置于20ml離心管中，加入100g/L氫氧化鈉溶液2.0ml、銅試劑溶液2.0ml，沸水浴中煮沸2min，冷卻，以3000r/min離心5min，棄去上清液。殘渣用洗滌液數(shù)毫升洗滌，離心后棄去上清液，反復(fù)操作3次，殘渣用10%（體積分數(shù)）硫酸溶液2.0ml溶解并轉(zhuǎn)移至50ml容量瓶中，加水稀釋至刻度，混勻，此液為樣品測定液體。 我們檢測時沉淀粗多糖一步中有較多沉淀，但在沉淀葡聚糖步驟中，離心后很少有沉淀。請各位老師指導(dǎo)一下，是方法有問題還是操作有問題呢，萬分感謝！ |
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2樓2025-02-11 17:32:49
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