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生物醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)外?/a>新蟲 (小有名氣)
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[交流]
點(diǎn)亮模型第4期 | 手把手教你非酒精性脂肪性肝炎（NASH）動(dòng)物模型構(gòu)建
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一、模型動(dòng)物的選擇 常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有大鼠、小鼠、家兔等，其中大鼠和小鼠的應(yīng)用最為廣泛，大鼠以 Wistar 和 Sprague Dawley（SD）為代表；小鼠的品系則更加多樣，其中C57BL/6J 最常見。 二、模型構(gòu)建方法 NASH模型主要有膳食動(dòng)物模型【高脂飲食（high-fat diet, HFD）模型、蛋氨酸和膽堿缺乏（methionine-choline deficient, MCD）飲食模型、高膽固醇和高膽酸鹽（high-cholesterol and high-cholate, HCh Ch）模型】、化學(xué)誘導(dǎo)模型【四氯化碳（CCl4）誘發(fā)模型、乙硫氨酸誘發(fā)模型、高糖高脂飲食+鏈脲佐菌素（STZ）誘發(fā)模型】、基因修飾動(dòng)物模型（DB/DB小鼠和OB/OB小鼠、Foz/Foz小鼠、SREBP-1c轉(zhuǎn)基因小鼠）等。 下面將常用的NASH模型的建模方法進(jìn)行總結(jié)梳理。 1、高脂飲食（HFD）模型高脂高果糖高膽固醇飲食，模擬人類疾病形成機(jī)制，周期較長。造模方法：大、小鼠使用D09100301（起酥油版本）或者D09100310（棕櫚油版本），動(dòng)物不會(huì)很胖，造模周期14周左右，可用于NASH模型構(gòu)建。 2、蛋氨酸限制、膽堿缺乏飲食，成模周期短，肝炎、肝纖維化。造模方法：1）MCD（蛋氨酸、膽堿缺乏飲食），MRCD（蛋氨酸微量、膽堿缺乏飲食），造模周期4-8周，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物狀態(tài)較差、逐漸消瘦，甚至死亡；2） HFMRCD（45%脂肪供能或60%脂肪供能基礎(chǔ)，蛋氨酸微量、缺乏及膽堿缺乏飲食），造模周期4-6周，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物可有效保持體重，生存周期也會(huì)延長。 3、四氯化碳（CCl4）誘導(dǎo)CCl4是最早采用的試驗(yàn)性脂肪肝模型誘導(dǎo)劑，可單獨(dú)施用或配合高脂飲食來誘發(fā)脂肪肝或肝纖維化。四氯化碳（CCl4）具有肝毒性，進(jìn)入機(jī)體后在肝內(nèi)產(chǎn)生活化氧自由基，過氧化作用增強(qiáng)，加快肝脂肪變性進(jìn)程，損傷肝細(xì)胞，造成肝細(xì)胞變性壞死，引起細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）過度沉積而成肝纖維化，其代謝產(chǎn)物還可以刺激肝臟Kupffer細(xì)胞，釋放促炎性細(xì)胞因子，進(jìn)一步加重肝臟的損傷。這種方法造模時(shí)間較短（8周左右），形成率高。適用于肝纖維化的研究。但是發(fā)病機(jī)制、病程變化及組織學(xué)形態(tài)與人類脂肪肝存在較大差異，并且CCl4具有較強(qiáng)的毒性，易致動(dòng)物死亡。 4、四環(huán)素誘導(dǎo)四環(huán)素屬于抗生素類藥物，具有肝毒性，可用于誘發(fā)動(dòng)物脂肪肝。其主要通過干擾線粒體DNA復(fù)制或轉(zhuǎn)錄，抑制載脂蛋白合成并影響線粒體脂肪酸β-氧化，抑制肝臟極低密度脂蛋白的釋放，脂質(zhì)以脂滴形式聚于肝細(xì)胞內(nèi)，繼而造成肝細(xì)胞脂肪變性。該模型造模時(shí)間短，費(fèi)用低，藥物毒性較CCl4弱，脂肪變性顯著，適用于模擬某些環(huán)境因素所致的NAFLD研究，也具有CCl4類似的缺點(diǎn)。 |
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