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yabxxh木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
關(guān)于His標(biāo)簽蛋白不結(jié)合鎳柱的問(wèn)題，有沒(méi)有有經(jīng)驗(yàn)的大神來(lái)指點(diǎn)一二，多謝
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最近做一個(gè)蛋白，N端就是M+6xHis+目的蛋白，結(jié)構(gòu)很簡(jiǎn)單。 表達(dá)量不錯(cuò)，可溶表達(dá)也很好，但是遇到一個(gè)非常奇怪的問(wèn)題，就是目的蛋白始終無(wú)法結(jié)合鎳柱，洗脫液中無(wú)法檢測(cè)到目的蛋白。電泳圖上可以看出，目的蛋白全部穿出，載體部分經(jīng)過(guò)測(cè)序，沒(méi)有問(wèn)題。 所以，有沒(méi)有遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題的同學(xué)，來(lái)交流一下，后面都是怎么解決的。 目前打算前面增加His數(shù)量到8,10個(gè)，或者在His后面加一個(gè)linker， 請(qǐng)各位不吝賜教。  |
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yubeihong
鐵桿木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
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9樓2025-01-24 15:19:53
yabxxh
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2樓2024-06-24 17:52:49
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3樓2024-06-24 18:22:28
yabxxh
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4樓2024-06-25 15:05:44
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