 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (6626)
- >導(dǎo)師招生 (1450)
- >考研 (1338)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (899)
- >文獻(xiàn)求助 (406)
- >考博 (262)
- >休閑灌水 (201)
- >碩博家園 (161)
- >基金申請(qǐng) (97)
- >論文投稿 (81)
- >公派出國(guó) (70)
- >論文道賀祈福 (68)
- >招聘信息布告欄 (61)
- >教師之家 (61)
- >博后之家 (60)
- >SciFinder/Reaxys (40)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1220 | 回復(fù): 2 | |||
科研小道新蟲(chóng) (初入文壇)
|
[交流]
菌株熒光標(biāo)記方法 已有1人參與
|
|
綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)作為一種理想的活體熒光標(biāo)記分子，越來(lái)越多地被用于活細(xì)胞或微生物的定位、結(jié)構(gòu)和動(dòng)力學(xué)的研究，也可以通過(guò)測(cè)定GFP的熒光強(qiáng)度對(duì)菌株中GFP的表達(dá)量進(jìn)行定量分析[1]。GFP已經(jīng)在許多細(xì)菌中完成了轉(zhuǎn)化，如：（1）利用GFP追蹤了乳酸乳球菌WH-C1在小鼠腸道內(nèi)的定植情況；（2）利用GFP發(fā)現(xiàn)德氏乳桿菌D17嵌入在黏液層中，局部接近腸道的上皮細(xì)胞；（3）在植物乳桿菌WCFS1中進(jìn)行GFP標(biāo)記，研究WCFS1在腸道內(nèi)的定植與分布。 紅色熒光蛋白 (Red Fluorescent Protein, RFP)相比綠色熒光蛋白 (GFP)其靈敏度更高, 是基于GFP基礎(chǔ)上的一種優(yōu)良穩(wěn)定的熒光蛋白。目前已在不同的菌株中成功進(jìn)行RFP標(biāo)記，如：（1）在根瘤菌中進(jìn)行RFP熒光標(biāo)記，可探究根瘤菌結(jié)瘤固氮能力及根瘤菌與土著菌競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系 [2]；（2）構(gòu)建了以紅色熒光蛋白基因 (dsred2) 為標(biāo)記, 以α-淀粉酶 (amy) 為報(bào)告基因的表達(dá)載體, 成功實(shí)現(xiàn)了融合基因dsred2-amy在干酪乳桿菌中的融合表達(dá)；（3）銅綠假單胞菌中轉(zhuǎn)入RFP標(biāo)記，證實(shí)其在含油多孔物質(zhì)中的遷移擴(kuò)散及所受限制[3]；（4）在幽門(mén)26695中構(gòu)建了GFP和RFP熒光標(biāo)記，用于探究幽門(mén)的遺傳調(diào)控和信號(hào)追蹤[4]。 mCherry熒光蛋白也叫櫻桃熒光蛋白，是從蘑菇珊瑚（mushroom coral）中分離出來(lái)的單體紅色熒光蛋白，相較于其它單體熒光蛋白，其顏色和單體分子的光穩(wěn)定性更強(qiáng)。mCherry熒光標(biāo)記技術(shù)在細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和神經(jīng)科學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域都有廣泛應(yīng)用，用于追蹤蛋白質(zhì)、細(xì)胞器或其他生物大分子在活細(xì)胞中的分布和動(dòng)態(tài)。近年來(lái), mCherry用于熒光標(biāo)記的研究報(bào)道逐漸增多, 相對(duì)其他熒光蛋白, 該熒光標(biāo)記具有標(biāo)記基因小、背景低等優(yōu)點(diǎn), 且與已報(bào)道的dsred2紅色熒光基因相比, 其熒光強(qiáng)度及穩(wěn)定性更好。目前已成功在多種菌株中進(jìn)行標(biāo)記：如：（1）成功在蒙氏腸球菌ST4SA和植物乳桿菌423中進(jìn)行mCherry熒光蛋白標(biāo)記；（2）在植物乳桿菌中進(jìn)行mCherry熒光蛋白標(biāo)記，是探究其在生物體內(nèi)的定位、示蹤及益生性作用機(jī)制的有效技術(shù)手段[5]。 實(shí)驗(yàn)流程： 1：構(gòu)建熒光標(biāo)記載體； 2：電轉(zhuǎn)至受體菌； 3：涂布抗性篩選平板； 4：抗性篩選培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)； 5：PCR驗(yàn)證質(zhì)粒是否存在； 6：紫外驗(yàn)證熒光； 7：抗性篩選培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng) 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有124人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
★
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
| 好 |
2樓2024-05-28 10:51:26
科研小道
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 99
- 帖子: 29
- 在線: 3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 35263946
- 注冊(cè): 2024-04-03
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物遺傳育種學(xué)
3樓2024-05-29 09:39:52
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 科研小道 的主題更新
| 3 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[基金申請(qǐng)]
NSFC申報(bào)書(shū)里申請(qǐng)人簡(jiǎn)歷中代表性論著還需要在申報(bào)書(shū)最后的附件里面再上傳一遍嗎
 20+3
|
NSFC2026我來(lái)了 2026-03-10 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[文學(xué)芳草園] 伙伴們，祝我生日快樂(lè)吧 +3 | myrtle 2026-03-10 | 4/200 |
|
|
|
[考博] 讀博申請(qǐng) +5 | 感dd 2026-03-10 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +6 | 超級(jí)伊昂大王 2026-03-10 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 327分求調(diào)劑086 +4 | 西紅柿?小帥 2026-03-09 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 化工284求調(diào)劑 +12 | 小黑想變白 2026-03-07 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 294 英二數(shù)二物化 求調(diào)劑 +6 | 米飯團(tuán)不好吃 2026-03-09 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 295復(fù)試調(diào)劑
+4
|
簡(jiǎn)木ChuFront 2026-03-09 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +3 | squirtle11 2026-03-07 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿211 材料與化工 280求調(diào)劑 +3 | Sanity蔣 2026-03-08 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0701-322 求調(diào)劑 +3 | jiliuxian 2026-03-06 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑085600材料與化工 +13 | Daunrin 2026-03-07 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 拾柒12。 2026-03-08 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 347求調(diào)劑 +4 | 浮云滿足 2026-03-07 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程317分求調(diào)劑 +9 | 6汆尼9 2026-03-07 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 346分材料求調(diào)劑 +5 | snow_反季節(jié)版 2026-03-07 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿211 化學(xué)305分求調(diào)劑 +3 | 0703楊悅305分 2026-03-05 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 誠(chéng)求調(diào)劑，323分 有專利/科研/實(shí)習(xí)經(jīng)歷 +6 | 橙子cyx 2026-03-06 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿211 085600 280數(shù)二英二求調(diào)劑 +3 | 月山斜 2026-03-06 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +4 | 大爆炸難民 2026-03-06 | 5/250 |
|