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| 【懸賞金幣】回答本帖問題,作者段伏yyh將贈送您 15 個金幣 | ||
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大片段基因擴增不出來,求助 已有3人參與
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課題需要做呼腸孤病毒反向遺傳操作系統(tǒng),擴增片段擴不出來,截斷擴依舊不行。溫度梯度,模版量和循環(huán)次數(shù)都做了優(yōu)化,換了兩款高保酶,還是不行。 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
銅蟲 (小有名氣)

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擴增不出來,是指無條帶?還是條帶大小不對?從描述上看,感覺是擴增不出條帶。如果無條帶,可以先找一個確定能夠擴增出來的基因作為陽性對照,排除模板、試劑或者操作問題,個人遇到過,最好換一批次模板。如果是條帶大小不對,推測可能是是片段太長,或許分成三段會好一點。擴出來以后再通過多片段重組或者PCR的方式連起來。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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