擴(kuò)增不出來(lái)，是指無(wú)條帶？還是條帶大小不對(duì)？從描述上看，感覺(jué)是擴(kuò)增不出條帶。如果無(wú)條帶，可以先找一個(gè)確定能夠擴(kuò)增出來(lái)的基因作為陽(yáng)性對(duì)照，排除模板、試劑或者操作問(wèn)題，個(gè)人遇到過(guò)，最好換一批次模板。如果是條帶大小不對(duì)，推測(cè)可能是是片段太長(zhǎng)，或許分成三段會(huì)好一點(diǎn)。擴(kuò)出來(lái)以后再通過(guò)多片段重組或者PCR的方式連起來(lái)。

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8樓2024-04-07 10:02:06

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段伏yyh

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8樓: Originally posted by 雪落迷城 at 2024-04-07 10:02:06
擴(kuò)增不出來(lái)，是指無(wú)條帶？還是條帶大小不對(duì)？從描述上看，感覺(jué)是擴(kuò)增不出條帶。如果無(wú)條帶，可以先找一個(gè)確定能夠擴(kuò)增出來(lái)的基因作為陽(yáng)性對(duì)照，排除模板、試劑或者操作問(wèn)題，個(gè)人遇到過(guò)，最好換一批次模板。如果是 ...

沒(méi)有條帶，換過(guò)四次模版了。也準(zhǔn)備分段擴(kuò)了融合。感謝

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9樓2024-04-07 23:56:10

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雪落迷城

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引用回帖:

9樓: Originally posted by 段伏yyh at 2024-04-07 23:56:10
沒(méi)有條帶，換過(guò)四次模版了。也準(zhǔn)備分段擴(kuò)了融合。感謝
...

或許可以試一試用普通的taq酶，如果能擴(kuò)出來(lái)。取取正常體系的十分之一taq酶，加入高保真

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10樓2024-04-08 01:33:36

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