 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1683 | 回復(fù): 6 | ||
| 【懸賞金幣】回答本帖問(wèn)題，作者天兆9611將贈(zèng)送您 5 個(gè)金幣 | ||
天兆9611鐵蟲(chóng) (小有名氣)
|
[求助]
提取質(zhì)粒求助 已有1人參與
|
|
|
提取革蘭氏陽(yáng)性菌中pSIP 411質(zhì)粒，按照天根高純質(zhì)粒小提取試劑盒方法提取，具體步驟如下： 1.柱平衡步驟：向吸附柱CP4中（吸附柱放入收集管中）加入500 µL的平衡液BL, 12,000 rpm離心1 min,倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。 2.取2 mL過(guò)夜培養(yǎng)的菌液加入離心管中，12,000 rpm離心1 min,盡量吸除上清。 3.向留有菌體沉淀的離心管中加入500 µL溶液P1（已加入RNase A）,使用移液器或渦旋振蕩器徹底懸浮細(xì)菌細(xì)胞沉淀，加入70 µL溶菌酶37 ℃處理30 min 。 4.向離心管中加入500 µL溶液P2,溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次使菌體充分裂解。 5.向離心管中加入700 µL溶液P3,立即溫和地上下翻轉(zhuǎn)6-8次，充分混勻，此時(shí)會(huì)出現(xiàn)白色絮狀沉淀。12,000 rpm離心10 min，此時(shí)在離心管底部形成沉淀。 6.將上一步收集的上清液分次加入過(guò)濾柱CS（過(guò)濾柱放入收集管中）, 12000 rpm離心2 min,小心地將離心后收集管中得到的溶液分次加入吸附柱CP4中 7.12,000 rpm離心1 min,倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CP4放入收集管中。 8.向吸附柱CP4中加入500 µL去蛋白液PD, 12000 rpm離心1 min,倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CP4放入收集管中。 9.向吸附柱CP4中加入600 µL漂洗液PW (已加入無(wú)水乙醇)，12000 rpm離心1 min,倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CP4放入收集管中。 10.重復(fù)操作步驟9 11.將吸附柱CP4重新放回收集管中置于12,000 rpm離心2 min,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除。 12.將吸附柱CP4置于一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加60 µL洗脫緩沖液TB,室溫放置2 min, 12000 rpm離心1 min將質(zhì)粒溶液收集到離心管中，將溶液再次加入到吸附膜上室溫放置2 min，12000 rpm離心1 min之后保存在-20 ℃中。 以上提取完質(zhì)粒后進(jìn)行電泳，使用1%的膠，150 V 25 min（機(jī)器比較老了，以前150 V 15 min就可以了），染劑是gel red，之后照膠的圖是這樣的請(qǐng)問(wèn)有大神支個(gè)招嗎？需要做什么優(yōu)化和改進(jìn)？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
推薦一些20種氨基酸檢測(cè)的實(shí)際應(yīng)用案例
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有156人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
天兆9611
鐵蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 189.1
- 散金: 5
- 帖子: 68
- 在線: 8.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 7058362
- 注冊(cè): 2017-08-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
2樓2023-06-12 16:16:45
天兆9611
鐵蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 189.1
- 散金: 5
- 帖子: 68
- 在線: 8.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 7058362
- 注冊(cè): 2017-08-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
3樓2023-06-12 16:25:39
4樓2023-06-15 16:57:08
天兆9611
鐵蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 189.1
- 散金: 5
- 帖子: 68
- 在線: 8.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 7058362
- 注冊(cè): 2017-08-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
5樓2023-06-16 10:37:32
syyyyss
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 58
- 帖子: 26
- 在線: 2.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 29005100
- 注冊(cè): 2022-03-08
- 專業(yè): 細(xì)胞生物學(xué)
6樓2023-09-11 08:37:14
tybo 
金蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1010.9
- 散金: 100
- 紅花: 3
- 帖子: 1390
- 在線: 330.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1896213
- 注冊(cè): 2012-07-16
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
7樓2023-10-19 09:26:22
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 天兆9611 的主題更新
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 264求調(diào)劑 +7 | 26調(diào)劑 2026-03-03 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 085600 材料與化工 298 +8 | 小西笑嘻嘻 2026-03-03 | 8/400 |
|
|
[考研]
 0703化學(xué)學(xué)碩 288分
+4
|
旅行中的紫葡萄 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 304分材料專碩求調(diào)劑 +3 | qiuzhigril 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +4 | Afy123456 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +3 | sgbl 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿中科大能動(dòng)297求調(diào)劑，本科川大 +3 | 邵11 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
計(jì)算機(jī)學(xué)碩 分?jǐn)?shù)285求調(diào)劑
+4
|
glwshine 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程專碩307求調(diào)劑 +3 | ccc! 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)0703求調(diào)劑 學(xué)碩 理/工科均可 總分279 +3 | 1一11 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)材料與化工281求調(diào)劑，有科研和獲獎(jiǎng)經(jīng)歷 +6 | wsxw 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +5 | 13853210211 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +3 | 少71.8 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 【2026 碩士調(diào)劑】課題組 招收調(diào)劑生 +3 | 考研版棒棒 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856材料求調(diào)劑 +12 | hyf hyf hyf 2026-02-28 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 一志愿山東大學(xué)材料與化工325求調(diào)劑 +5 | 半截的詩(shī)0927 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 化工專碩342，一志愿大連理工大學(xué)，求調(diào)劑 +6 | kyf化工 2026-02-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +9 | 材料專碩調(diào)劑； 2026-02-28 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +6 | 曼殊2266 2026-02-28 | 7/350 |
|
|
|
[高分子] 求環(huán)氧樹(shù)脂研發(fā)1名 +3 | 孫xc 2026-02-25 | 11/550 |
|