 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4104 | 回復(fù): 1 | |||
Sh畢合生物
|
[交流]
轉(zhuǎn)膜時(shí)大分子量和小分子量蛋白，該如何選擇膜孔徑? 已有1人參與
|
|
對所有的蛋白，我們推薦用 Nitrocellulose Sandwiches #12369（0.2 μm）的雜交膜去轉(zhuǎn)膜，尤其是分子量低于 30 KD 的蛋白，建議使用較高濃度（12-15%）的蛋白分離膠并縮短轉(zhuǎn)膜的時(shí)間，建議在 1 小時(shí)以內(nèi)。 大分子量蛋白（> 150 kDa）推薦使用 tris-acetate SDS-PAGE 凝膠系統(tǒng)，而不是傳統(tǒng)的（tris-glycine），以及 5% 的甲醇。因?yàn)?tris-acetate 凝膠是在一個(gè)中性 pH 的條件下，所以分辨率比較高而且遷移的也更加精準(zhǔn)。 低濃度的甲醇可以使轉(zhuǎn)膜的效率更高（25 mM Tris base，0.2 M glycine，5% methanol）。長時(shí)間的轉(zhuǎn)膜（3 小時(shí)，70 伏）也是很有幫助的。對 mTOR 來說長時(shí)間的轉(zhuǎn)膜可能不一定有效，因?yàn)?mTOR 是個(gè)高表達(dá)蛋白，一般來說用常規(guī)的 protocol 也可以得到比較好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，但是對于 BRCA1，ATM，ATR 等這些大分子量蛋白還是十分有幫助的。 作者：畢合生物 公眾號(hào)：畢合生物 畢合生物提供服務(wù)內(nèi)容：分子生物學(xué)、免疫, 重組蛋白及ELISA相關(guān)、活性小分子化合物、高端化學(xué)、材料化學(xué)、細(xì)胞資源庫與培養(yǎng)相關(guān)、生命科學(xué)、天然產(chǎn)物 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
2026 法國csc 個(gè)人渠道招聘。計(jì)算機(jī)/生物信息/evolution/network優(yōu)先
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
蛋白條帶歪
已經(jīng)有1人回復(fù)
-
生物物理、生物化學(xué)與分子生物學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有291人回復(fù)
-
金屬離子與化合物分子對接
已經(jīng)有1人回復(fù)
-
求助參苓白術(shù)口服液、肥兒口服液，兒康寧糖漿的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)！
已經(jīng)有2人回復(fù)
-
香港中文大學(xué)醫(yī)學(xué)院 誠聘 研究助理教授 (醫(yī)工結(jié)合/生物信息學(xué)方向)
已經(jīng)有23人回復(fù)
-
26秋季生物學(xué)方向博士申請
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
26秋季生物學(xué)方向博士申請
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
生物學(xué)考研調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
一志愿暨大生物學(xué)290求求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
廈大309分生物與醫(yī)藥調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
970114
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 246.8
- 散金: 10
- 帖子: 143
- 在線: 19.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 8286624
- 注冊: 2018-03-16
- 專業(yè): 藥理學(xué)
2樓2024-07-13 09:32:28
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 Sh畢合生物 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 歡迎采礦、地質(zhì)、巖土、計(jì)算機(jī)、人工智能等專業(yè)的同學(xué)報(bào)考 +8 | pin8023 2026-02-28 | 11/550 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +4 | Afy123456 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
085600 英一數(shù)二272求調(diào)劑
 5+6
|
vida_a 2026-03-01 | 44/2200 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)306調(diào)劑 +4 | 26要上岸 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 264求調(diào)劑 +6 | 26調(diào)劑 2026-03-03 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 276求調(diào)劑 +8 | 路lyh123 2026-02-28 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 266材料化工求調(diào)劑 +3 | 哇塞王帥 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿中科大能動(dòng)297求調(diào)劑，本科川大 +3 | 邵11 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程專碩307求調(diào)劑 +3 | ccc! 2026-03-03 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑 +3 | 少71.8 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)，材料，環(huán)境類求調(diào)劑 +7 | 考研版棒棒 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0854總分272 +3 | 打小就是老實(shí)人 2026-03-02 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料工程274求調(diào)劑 +5 | Lilithan 2026-03-01 | 5/250 |
|
|
|
[考博] 博士自薦 +4 | kkluvs 2026-02-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿華南理工大學(xué)材料與化工326分，求調(diào)劑 +3 | wujinrui1 2026-02-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 熬夜的貓頭鷹 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 272求調(diào)劑 +6 | 田智友 2026-02-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 一志愿中南大學(xué)理學(xué)化學(xué)
+4
|
15779376950 2026-03-01 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 295復(fù)試調(diào)劑 +3 | 簡木ChuFront 2026-03-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 317一志愿華南理工電氣工程求調(diào)劑 +6 | Soliloquy_Q 2026-02-28 | 11/550 |
|