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[交流]
CL-APC和APC到底有什么區(qū)別？
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大家好，我是流式熒光崔工，一個旨在鏈接與流式熒光相關的朋友，一起賺錢、一起學習、一起工作、一起生活的靚仔。 前面的文章?lián)f80%以上的抗體都是他們家篩選的？ 寫了崔工跟一個潛在合作商的聊天。 有讀者發(fā)崔工微信說，這對搞研發(fā)的來說是一個致命的打擊，還怎么讓他們活。 崔工覺得，早一點通過崔工這個賬號了解到有這么一家公司存在，他們干比你自己干可以節(jié)約時間上的成本，可以節(jié)約資金，可以提高效率。 避免了大量時間和資金投入后還沒有別人干得好的悲劇，早一點認識到自己的不足，早一點認清現(xiàn)實，調(diào)整方向，未必不是一個好事。 也有讀者留言說，不太相信每年可以篩選出10個那么多的抗體。 信與不信，沒有對錯，不會產(chǎn)生什么影響。 接下來你的行為才會有對應的結果和回報。 — 1 — 今天有位老師向崔工咨詢交聯(lián)APC（又叫cross link APC，簡寫為CL-APC）和普通的APC有什么區(qū)別？ 其實從熒光的角度來說，CL-APC和APC沒有很大的本質(zhì)區(qū)別。 在分子量、基團、摩爾吸光系數(shù)、EM、EX上沒有什么區(qū)別。 它們的分子量都是104KD。 最大吸收峰：652；±2 nm 熒光發(fā)射峰：662；±2 nm 圖片 摩爾吸光系數(shù)7.3*100000M-1cm-1。 量子產(chǎn)率0.68。 產(chǎn)品形態(tài)凍干粉、沉淀都有。 但價格相差很多，CL-APC差不多是普通APC的2倍以上。 這些基本的東西既然都差不多，那價格為什么會相差那么多，它們到底有什么區(qū)別呢？我們又如何來選擇使用呢？ 這就要從它們的結構上說了，也是它們之間唯一不一樣的地方。 它們的分子結構為通過硫醚鍵連接的載體蛋白與開鏈線性延展的四咯化合物。 它的子結構里邊由蛋白的亞基組成，這個亞基為(alpha-beta)3。 每個 alpha-亞基和 beta-亞基約為17KD。 我們平常所說的這個CL-APC，就是把α和β這兩條鏈，通過化學反應的辦法把它們連在一起。 這就是CL-APC與APC的區(qū)別，也是唯一的區(qū)別。 那這個唯一的區(qū)別對后期的使用會產(chǎn)生什么樣的影響？ 我們可以用一張圖來輔助說明。 圖片 這是用Naclo4分別對CL-APC和APC的影響圖。 紅色的是沒有加Naclo4的圖，藍色的是加了Naclo4后的圖。 Naclo4是一種可以使蛋白變性的一種鹽，所以我們看到在這個高鹽的情況下。 APC的吸收會有所下降，大概降低到了620，而CL-APC在這種高鹽的情況下，它的這個吸收幾乎沒有變化。 也就是說CL-APC比APC穩(wěn)定性要好，它的結構不易發(fā)生改變。 從圖看CL-APC要比APC要好，那到底用那種來進行抗體標記呢？ 用以前的文章中的話來說，最好的不一定是最適合的，最適合的才是最好的。 酒雖好，但不能貪杯，貪杯了你就會收到傷害。 在你的標記工藝、存儲體系、環(huán)境中是否有影響到APC不穩(wěn)定的因素，比如高鹽，高溫等。 如果有那選擇CL-APC，如果沒有就用APC就可以了。 今天的文章就分享到這，如果今天的文章對您有一點點幫忙或一絲絲的啟發(fā)，歡迎幫忙點個在看和轉(zhuǎn)發(fā)，也可加崔工微信進一步交流溝通。 |
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