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流式熒光崔新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
CL-APC和APC到底有什么區(qū)別？
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大家好，我是流式熒光崔工，一個(gè)旨在鏈接與流式熒光相關(guān)的朋友，一起賺錢、一起學(xué)習(xí)、一起工作、一起生活的靚仔。 前面的文章?lián)f(shuō)80%以上的抗體都是他們家篩選的？ 寫了崔工跟一個(gè)潛在合作商的聊天。 有讀者發(fā)崔工微信說(shuō)，這對(duì)搞研發(fā)的來(lái)說(shuō)是一個(gè)致命的打擊，還怎么讓他們活。 崔工覺(jué)得，早一點(diǎn)通過(guò)崔工這個(gè)賬號(hào)了解到有這么一家公司存在，他們干比你自己干可以節(jié)約時(shí)間上的成本，可以節(jié)約資金，可以提高效率。 避免了大量時(shí)間和資金投入后還沒(méi)有別人干得好的悲劇，早一點(diǎn)認(rèn)識(shí)到自己的不足，早一點(diǎn)認(rèn)清現(xiàn)實(shí)，調(diào)整方向，未必不是一個(gè)好事。 也有讀者留言說(shuō)，不太相信每年可以篩選出10個(gè)那么多的抗體。 信與不信，沒(méi)有對(duì)錯(cuò)，不會(huì)產(chǎn)生什么影響。 接下來(lái)你的行為才會(huì)有對(duì)應(yīng)的結(jié)果和回報(bào)。 — 1 — 今天有位老師向崔工咨詢交聯(lián)APC（又叫cross link APC，簡(jiǎn)寫為CL-APC）和普通的APC有什么區(qū)別？ 其實(shí)從熒光的角度來(lái)說(shuō)，CL-APC和APC沒(méi)有很大的本質(zhì)區(qū)別。 在分子量、基團(tuán)、摩爾吸光系數(shù)、EM、EX上沒(méi)有什么區(qū)別。 它們的分子量都是104KD。 最大吸收峰：652；±2 nm 熒光發(fā)射峰：662；±2 nm 圖片 摩爾吸光系數(shù)7.3*100000M-1cm-1。 量子產(chǎn)率0.68。 產(chǎn)品形態(tài)凍干粉、沉淀都有。 但價(jià)格相差很多，CL-APC差不多是普通APC的2倍以上。 這些基本的東西既然都差不多，那價(jià)格為什么會(huì)相差那么多，它們到底有什么區(qū)別呢？我們又如何來(lái)選擇使用呢？ 這就要從它們的結(jié)構(gòu)上說(shuō)了，也是它們之間唯一不一樣的地方。 它們的分子結(jié)構(gòu)為通過(guò)硫醚鍵連接的載體蛋白與開(kāi)鏈線性延展的四咯化合物。 它的子結(jié)構(gòu)里邊由蛋白的亞基組成，這個(gè)亞基為(alpha-beta)3。 每個(gè) alpha-亞基和 beta-亞基約為17KD。 我們平常所說(shuō)的這個(gè)CL-APC，就是把α和β這兩條鏈，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)的辦法把它們連在一起。 這就是CL-APC與APC的區(qū)別，也是唯一的區(qū)別。 那這個(gè)唯一的區(qū)別對(duì)后期的使用會(huì)產(chǎn)生什么樣的影響？ 我們可以用一張圖來(lái)輔助說(shuō)明。 圖片 這是用Naclo4分別對(duì)CL-APC和APC的影響圖。 紅色的是沒(méi)有加Naclo4的圖，藍(lán)色的是加了Naclo4后的圖。 Naclo4是一種可以使蛋白變性的一種鹽，所以我們看到在這個(gè)高鹽的情況下。 APC的吸收會(huì)有所下降，大概降低到了620，而CL-APC在這種高鹽的情況下，它的這個(gè)吸收幾乎沒(méi)有變化。 也就是說(shuō)CL-APC比APC穩(wěn)定性要好，它的結(jié)構(gòu)不易發(fā)生改變。 從圖看CL-APC要比APC要好，那到底用那種來(lái)進(jìn)行抗體標(biāo)記呢？ 用以前的文章中的話來(lái)說(shuō)，最好的不一定是最適合的，最適合的才是最好的。 酒雖好，但不能貪杯，貪杯了你就會(huì)收到傷害。 在你的標(biāo)記工藝、存儲(chǔ)體系、環(huán)境中是否有影響到APC不穩(wěn)定的因素，比如高鹽，高溫等。 如果有那選擇CL-APC，如果沒(méi)有就用APC就可以了。 今天的文章就分享到這，如果今天的文章對(duì)您有一點(diǎn)點(diǎn)幫忙或一絲絲的啟發(fā)，歡迎幫忙點(diǎn)個(gè)在看和轉(zhuǎn)發(fā)，也可加崔工微信進(jìn)一步交流溝通。 |
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