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zljg8260新蟲 (小有名氣)
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[交流]
為什么我的融合PCR總是失敗 已有2人參與
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各位大佬，有人知道融合PCR具體怎么做好嗎，重疊部分大概多長合適，然后兩條模板的量大概要加多少，比如50ul體系，200ng/ul的1000bp的模板應(yīng)該加多少，預(yù)反應(yīng)的話有什么注意的 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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Glenice Y
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這個實驗要注意的細節(jié)很多，尤其是同源臂的設(shè)計長度，一般我是按照1:1加 這時候你要按照長度計算，加入量的確定，其實一般很少的量就可以了10ng這樣子 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2023-04-25 23:56:41
泡沫12
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A和B片段我一般overlap 30 bp，50ul體系各加200ng，不加引物，PCR 10個循環(huán)，之后取2ul做模板，各加1.5ul上下游引物，進行PCR 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
2樓2023-04-25 23:16:04
zljg8260
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4樓2023-04-26 00:12:16
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5樓2023-04-26 00:14:47
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