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2280ke銅蟲(chóng) (小有名氣)
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實(shí)驗(yàn)操作分享：博來(lái)霉素致大鼠肺纖維化模型
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健康雄性 Wistar大鼠,鼠齡 8~10 周,體重 250士50g。 博來(lái)霉素致肺纖維化模型的劑量:大鼠常用劑量多為5mg/kg,為8mg/kg,小鼠為3.5mg/kg。張偉等報(bào)道博來(lái)霉素1mg/kg氣管插管快速灌注法可以成功復(fù)制大品肺間質(zhì)纖維化模型。 其優(yōu)點(diǎn)是方法可靠、給藥劑量小、容易掌握,支氣管滴注 BLM 可能首先直接影響到終末細(xì)氣管上皮細(xì)胞,較早可引起肺泡內(nèi)的膠原沉積反應(yīng)。 整大鼠用10%水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔內(nèi)注射麻醉,將大鼠仰臥固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái),開(kāi)口器固定處用絲生理鹽 拉出舌,用壓舌板壓舌腹,在額鏡直視下,趁動(dòng)物吸氣瞬間迅速行氣管插管(Ф2mm,4~5cm)注人5mg/kgBLM0.2~0.3ml,立即旋轉(zhuǎn)動(dòng)物,使藥液在肺內(nèi)均勻分部;分別于第1、14、28天處死。第28天肺纖維化形成時(shí)可達(dá)到高峰。表現(xiàn)為肺泡壁厚度增加明顯,但胸膜增厚的程度尚輕標(biāo)本收集將大鼠全麻后稱體重,仰臥固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,沿腹正中線逐層切開(kāi)腹壁,鈍性分離,物腹主動(dòng)脈放血處死,剖胸分離左、右支氣管及雙肺,自氣管向右肺注入4%甲醛至胸膜展開(kāi)后結(jié)料;氣管,固定于4%甲醛液中1周,常規(guī)石蠟包埋,切片、HE 染色,進(jìn)行組織學(xué)評(píng)價(jià)。 肺組織形態(tài)學(xué)定量:用尺型微型測(cè)微器和td600version1.0真彩色病理細(xì)胞圖像分析系統(tǒng)在 HEX400倍下測(cè)定肺泡間隔寬度(μm)及胸膜厚度(μm),每張切片觀察10個(gè)視野,每個(gè)視野測(cè)3個(gè) 肺泡壁,取平均值。 |
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