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dummy’eye新蟲 (小有名氣)
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有人做過用重疊延伸pcr連接兩段基因嗎？我的兩基因重疊pcr后，目的條帶很亮，還沒什么雜帶。我膠回收后，再用兩段引物擴增，怎么都擴不出來了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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shuaibia6
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4樓2023-01-10 15:28:49
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5樓2023-01-10 16:44:45
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你好，我不太明白。兩基因都是膠回收得來。連接后測序結(jié)果顯示只有一個基因上有突變，有很多。跟引物好像沒啥關(guān)系吧，是延伸過程中錯配了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2023-01-11 11:57:39
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7樓2023-01-11 13:50:52
瀾滄的愛
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兩基因拼接的時候，減少一下循環(huán)數(shù)試試，20個循環(huán)基本就可以了。循環(huán)越多，可能發(fā)生的錯配越多。諾唯贊的phant高保真酶還可以，我之前拼接也是用它 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
8樓2023-02-01 11:56:44
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