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dummy’eye新蟲 (小有名氣)
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有人做過用重疊延伸pcr連接兩段基因嗎?我的兩基因重疊pcr后,目的條帶很亮,還沒什么雜帶。我膠回收后,再用兩段引物擴(kuò)增,怎么都擴(kuò)不出來了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
金蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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金蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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你好,我不太明白。兩基因都是膠回收得來。連接后測序結(jié)果顯示只有一個基因上有突變,有很多。跟引物好像沒啥關(guān)系吧,是延伸過程中錯配了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
金蟲 (小有名氣)
新蟲 (小有名氣)
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兩基因拼接的時候,減少一下循環(huán)數(shù)試試,20個循環(huán)基本就可以了。循環(huán)越多,可能發(fā)生的錯配越多。諾唯贊的phant高保真酶還可以,我之前拼接也是用它 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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