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Jackwangwang新蟲 (小有名氣)
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過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染問題！！
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請(qǐng)教一個(gè)問題，最近在做過表達(dá)，egfp質(zhì)粒構(gòu)建好了，但是往細(xì)胞轉(zhuǎn)染的過程中出現(xiàn)了問題，用了lipo2000，3000都沒能轉(zhuǎn)進(jìn)去，按照說明書操作，細(xì)胞一直不添加雙抗培養(yǎng)，傳至6孔板中，待匯合度至80%左右，進(jìn)行轉(zhuǎn)染，質(zhì)粒和脂質(zhì)體都是用opti稀釋輕輕吹打混勻，靜置5min，然后1:1混合，輕輕吹打混勻，靜置20min，添加至六孔板中(提前用pbs清洗六孔板），培養(yǎng)箱培養(yǎng)4-6h，然后換成完全培養(yǎng)基12-24h觀察，沒有熒光。想問問有沒有做過h9c2轉(zhuǎn)染的，請(qǐng)教一下到底哪里出了問題？ @biostar2009 @飛約瘋?cè)嗽?/u> @wizardfan @youlinglyw 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2022-11-19 10:42:47
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