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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 干擾/敲除 » 過表達質粒轉染問題�。�
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| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者Jackwangwang將贈送您 20 個金幣 | |||
Jackwangwang新蟲 (小有名氣)
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[求助]
過表達質粒轉染問題！！
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請教一個問題，最近在做過表達，egfp質粒構建好了，但是往細胞轉染的過程中出現(xiàn)了問題，用了lipo2000，3000都沒能轉進去，按照說明書操作，細胞一直不添加雙抗培養(yǎng)，傳至6孔板中，待匯合度至80%左右，進行轉染，質粒和脂質體都是用opti稀釋輕輕吹打混勻，靜置5min，然后1:1混合，輕輕吹打混勻，靜置20min，添加至六孔板中(提前用pbs清洗六孔板），培養(yǎng)箱培養(yǎng)4-6h，然后換成完全培養(yǎng)基12-24h觀察，沒有熒光。想問問有沒有做過h9c2轉染的，請教一下到底哪里出了問題？ @biostar2009 @飛約瘋人院 @wizardfan @youlinglyw 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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2樓2022-11-19 10:42:47
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