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Qwerty999新蟲 (初入文壇)
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[求助]
阿米巴全基因組DNA提取 已有2人參與
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各位老師， 最近在做阿米巴全基因組DNA提取，試過酚-氯仿法、過柱子的試劑盒、磁珠的試劑盒，效果都不好，有拖尾，送公司質(zhì)檢也總是報(bào)告“DNA嚴(yán)重降解”，后來加了RNA酶室溫5min，小片段拖尾少了，但是如果同樣RNA酶水浴37℃ 1h就會(huì)發(fā)現(xiàn)我認(rèn)為的DNA條帶也不見了！這是為什么啊，難道DNA直接沒有提取出來嗎？我還按照文獻(xiàn)上液氮凍融、研磨的方式進(jìn)行了提取，發(fā)現(xiàn)只要液氮一處理，電泳條帶更糟糕。 今天聯(lián)系公司，想讓公司幫忙提取一次，公司說阿米巴有傳染性不給提取，只能自己做，也不收取回收的膠塊，我已經(jīng)做了一個(gè)月了，一點(diǎn)進(jìn)展都沒有  ，謝謝各位老師解答疑惑@biostar2009 |
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yubeihong
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2樓2022-08-15 22:44:44
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3樓2022-08-23 08:18:19
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4樓2022-08-23 08:24:40
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5樓2022-08-26 11:44:08
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6樓2022-08-26 21:43:03
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7樓2023-02-14 16:11:48
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【答案】應(yīng)助回帖
| 問了我們研發(fā)同事，從你的描述初步判斷可能是以下原因：1、即便室溫條件下，DNA也會(huì)降解，你這水域時(shí)間過長，導(dǎo)致DNA降解；2、目前市場上有多種RNA酶，不知道你用的是哪一種？某些RNA酶不是特異性消化RNA，也會(huì)消化DNA；3、可能DNA提取效果比較差；建議和我們的技術(shù)進(jìn)行溝通，上海領(lǐng)駿生物科技有限公司，www.lnjnbio.com；也可以用我們的磁珠法動(dòng)物組織DNA提取試劑盒試試； |
8樓2023-11-06 14:17:42
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1.樣本要離心過濾得到純的樣本 2.液氮研磨 3.加rna酶去掉rna 4.膠回收富集DNa 5.加我qq2589149676 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2023-11-07 23:31:54
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